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本文標(biāo)題："神經(jīng)壞死病毒帶原之點帶石斑魚螢光顯微鏡下觀察"

本實驗使用神經(jīng)壞死病毒帶原之點帶石斑魚，將其解剖取各組織以NNV PCR以及NNV Nested PCR檢測，發(fā)現(xiàn)幾乎各組織皆受到神經(jīng)壞死病毒的感染。由于神經(jīng)壞死病毒經(jīng)由血液可以檢測到，因此推測神經(jīng)壞死病毒會率先感染血液裡的某些成分，而將病毒帶往全身，造成全身性的感染。 首先將血液分成血清及血球組織，NNV Nested PCR從血清中偵測不出病毒的存在。將血球細(xì)胞分離，帶原魚隻白血球以標(biāo)幟神經(jīng)壞死病毒為單株抗體的免疫螢光方式于螢光顯微鏡下觀察，發(fā)現(xiàn)不是全部的白血球皆受到神經(jīng)壞死病毒的感染，且FITC螢光部位與細(xì)胞核的位置大致相同。 使用流式細(xì)胞儀，將白血球分選為淋巴球與嗜中性球兩群后，以Wright玻片染色法確定，進(jìn)行神經(jīng)壞死病毒的免疫螢光染色，總螢光數(shù)從1.1%提升為 97.2%，淋巴球群從3.1%提升為55.9%，嗜中性球群從1.3%提升為64.5%，以FITC螢光標(biāo)記可以得出兩細(xì)胞群皆有受到病毒的感染。此兩次細(xì)胞群的螢光強(qiáng)度比總螢光強(qiáng)度少了許多，推測遭受病毒感染更為嚴(yán)重的，為第三群次細(xì)胞群，將此細(xì)胞群分選后進(jìn)行免疫螢光染色，螢光數(shù)從3.6%提升為 99.2%，依其細(xì)胞大小(FSC)和顆粒的複雜度(SSC)，推測為巨噬細(xì)胞。希望以此結(jié)果未來能依其白血球的表面抗原研發(fā)出相對應(yīng)的拮抗物來阻斷與神經(jīng)壞死病毒的結(jié)合，以幫助石斑魚體對抗病毒的侵襲。