一、實驗動機:
工業(yè)技術日新月異,化舉藥品使用量隨之逐日升高。因為種種不慎,化學中毒的現(xiàn)象有增無減。鉛是毒性甚高的重金屬,也是工業(yè)界常用的。故本實驗選擇鉛為代表,研究其對雞胚發(fā)育的具體影響,進而推展到人體的反應。在生物研究上已成長中的雞胚是最早而直到目前仍被廣泛利用的活系統(tǒng),受精卵的易得,胚胎的迅速生長及容易改變它的環(huán)境。凡此種種使得雞胚成為一個模范系統(tǒng),可作形態(tài)上、生化上及功能上的種種研究。
二、實驗目的:
借著發(fā)育中之雞胚研究藥物Na2—EDTA對于Pb(CH3COO)2引發(fā)之中毒是否具有解毒功能。
三、實驗材料:
Pb(CH2COO)2—0.02 mg/0.1 ㏄ 0.04 mg/0.1 ㏄
0.06 mg/0.1 ㏄
Na2―EDTA―0.023 mg/0.1 ㏄ 0.046 mg/0.1 ㏄
0.069 mg/0.1㏄
CrO3 蒸餾水 70%酒精 種蛋
孵卵器 23號針頭 1 cc 針筒 高壓蒸汽消毒器
濾紙 尖頭剪刀 鑷子 滴管 培養(yǎng)皿 酒精燈 溫度計 解剖顯微鏡
放大鏡 加溫裝置 0.9%之生理食鹽水
四、實驗方法
(一)選擇粵東雞場同日所產(chǎn)之來亨雞種蛋。
孵卵期內(nèi)孵卵器保持38。C及65%~85%之一定濕度。1、Na2―EDTA,間隔時間分別為接著打,隔3小時及隔6小時Pb(CH3COO)2之濃度為0.02 mg/0.1㏄,Na2―EDTA之濃度為0.046 mg/0.1㏄及0.069 mg/0.1㏄
2、第3組又分3小組,為注射0.06 mg/0.1㏄之Pb(CH3COO)2后,緊接著注射不同濃度之Na2―EDTA其濃度分別為0.023 mg/0.1㏄,0.046 mg/0.1㏄及0.069 mg/0.1㏄。
(一)選擇犧牲日期――胚胎送入孵卵器滿19天后犧牲。
(二)觀察發(fā)育后期之雞胚︰
以剪刀柄輕輕敲裂雞蛋鈍端,小心取去卵殼,注意不要傷到卵膜,放入38℃之生理食鹽水中,繼續(xù)剝卵殼,小心剪開卵膜及胎膜,避免傷及胚胎。培養(yǎng)皿內(nèi)之生理食鹽水若混濁,可用滴管小心再換上溫暖之生理食鹽水,然后將整個培養(yǎng)皿放在解剖顯微鏡之載物臺上,用低倍鏡觀察。觀察項目為腦、腳、翼、喙及一般形態(tài)。
(三)量CR長度及稱重。