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本文標(biāo)題："利用光學(xué)顯微鏡觀察洋桔梗壞疽病毒"

洋桔梗壞疽病毒

光學(xué)顯微鏡觀察
利用橙綠蛋白質(zhì)染劑 Calcomine orange-Luxol brilliant
green BL) 染色感染 L N V 的洋桔梗葉片表皮細(xì)胞，以光學(xué)
顯微鏡鏡檢可于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)細(xì)胞核附近觀察到一種呈不規(guī)則
鬆散狀之類似內(nèi)含體構(gòu)造，健康對(duì)照則無 (圖一)。
電子顯微鏡觀察
純化之病毒以 2 % 醋酸鈾染色于電子顯微鏡下可觀察
到直徑約 32 nm 之球形病毒顆粒 (圖二 A )。超薄切片罹病
洋桔梗葉片柵狀組織之葉肉細(xì)胞原質(zhì)體內(nèi)可觀察到大量病
毒顆粒聚集于基質(zhì)內(nèi) (圖二 B )；葉肉細(xì)胞之細(xì)胞質(zhì)內(nèi)聚集
病毒顆粒 (圖二 C )。罹病洋桔梗之花瓣內(nèi)病毒顆粒分散于
整個(gè)空胞中 (圖二 D )。此外，機(jī)械接種 L N V 發(fā)病之奎藜、
煙草 (Nicotiana benthamiana)、絲瓜 (Luffa cylindrica) 等植
物的葉肉細(xì)胞內(nèi)亦都可觀察到病毒顆粒的分佈。
洋桔梗壞疽病毒之診斷
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圖一、感染洋桔梗壞疽病毒之洋桔梗表皮以橙綠蛋白質(zhì)染
劑染色光學(xué)顯微鏡觀察。罹病葉片表皮層 ( A ) 及健康 ( B )
橙綠蛋白質(zhì)染劑染色，并以 2 -甲氧基乙基醋酸褪色后于光
學(xué)顯微鏡檢可觀察到類似內(nèi)含體之構(gòu)造 ( I n ) 及細(xì)胞核