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本文標題："常見的細胞培養(yǎng)問題—解決辦法"

常見的細胞培養(yǎng)問題

1. 解凍后觀察:

1-1 鏡檢

(Microscopic)

1-1-1
細
胞
數
少

可能引起的原因

1. 解凍后若以離心方式去除

DMSO，部分細胞未有效沈

淀，細胞數將會減少。

解決方式

1. 考慮直接將解凍后的細胞懸

浮液加入含新鮮培養(yǎng)基中直

接培養(yǎng)，細胞貼附后，第二天

再更換培養(yǎng)基。

1-1-2
存
活
率
不
佳

2. 有些細胞容易絮聚而沈積在
2. 細 胞 解 凍 后 pipetting 5 至 7
冷凍管底部，若吸取細胞懸浮
次，混合均勻。
液前沒有充分混合均勻，則可
能只吸到細胞數較少的上清
液。

1-1-2-1

有 些 細 胞 本 身 冷 凍 后 存 活 率 不 解凍后先培養(yǎng)在 T25 flask。

佳或細胞數較少。

1-1-2-2

解凍后受 DMSO 毒害:

1. 細胞對 DMSO 的毒性較為敏 1. 解 凍 后 的 細 胞 必 須 立 刻 經 由

感，例如:HL-60 細胞。

2. 細胞解凍后，細胞懸浮液在冷 2. 先 將 所 有 實 驗 材 料 準 備 齊
全，培養(yǎng)基預熱好再進行解
凍管內時間拖太久。
凍。

3. 解 凍 后 的 細 胞 懸 浮 液 種 至 3. 至少加入 10ml 以上的新鮮培
養(yǎng)基或使 DMSO 濃度在 1 %
(seeding) 含 新 鮮 培 養(yǎng) 基 的

flask 內 ， 但 由 于 培 養(yǎng) 基 量 太

少而不足以稀釋 DMSO 的毒

性。

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解凍前后受溫度變化之傷害:

1. 收 到 本 所 寄 出 的 細 胞 后 沒 有

馬 上 解 凍 培 養(yǎng) 或 是 暫 存 在 -80

℃冰箱的時間太久。

離心方式去除 DMSO。

以下。

1. 收 到 細 胞 后 最 好 是 盡 速 解 凍

培養(yǎng)或暫存于-80℃冰箱，并于

翌日轉移到液氮筒內。若暫存

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