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本文標(biāo)題："請(qǐng)舉例說明DNA重組技術(shù)，如何應(yīng)用于人類致病病毒疫苗的開發(fā)？"
請(qǐng)舉例說明DNA重組技術(shù)，如何應(yīng)用于人類致病病毒疫苗的開發(fā)？
請(qǐng)解釋下列專有名詞？
（1） 南方墨漬雜交法（Southern Blot）
（2） DNA晶片（DNA Microarray）
（3） 晶片式全基因體定量分析技術(shù)
（Array Comparative Genomic Hybridization）
（4） 單一核苷酸多型性（Single Nucleotide Polymorphisms; SNPs）
（3） 晶片式全基因體定量分析技術(shù)
（Array Comparative Genomic Hybridization）
標(biāo)準(zhǔn)CGH Comparative Genomic Hybridization
是用于檢測(cè)部分的染色體trisomy或monosomy、以及染色體部分缺失或增多的'方法。
CGH的基礎(chǔ)是將待測(cè)組與對(duì)照組DNA與雜何的目標(biāo)進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)性的結(jié)合，雜合的目標(biāo)可以是用如同要進(jìn)行FISH時(shí)，平鋪于顯微鏡用玻片上的正常染色體，或者一組已知組成的BAC選殖株DNA，以陣列化的格式點(diǎn)制而成的玻片。
簡(jiǎn)單來說，就是分析特定DNA和腫瘤細(xì)胞內(nèi)copy number的改變(獲得/失去)
（5） 基因序列考貝數(shù)多型性（Copy Number Polymorphisms; CNPs）
二、請(qǐng)舉例說明DNA重組技術(shù)，如何應(yīng)用于人類致病病毒疫苗的開發(fā)？
DNA疫苗
利用基因工程技術(shù)將抗原的機(jī)印植入表現(xiàn)質(zhì)體(expression plasmid)，將其作為疫苗打入人或動(dòng)物體后，表現(xiàn)直體在細(xì)胞內(nèi)表現(xiàn)并產(chǎn)生抗原蛋白而達(dá)到引發(fā)免疫反應(yīng)的效果。
優(yōu)點(diǎn):免疫效果佳、穩(wěn)定、儲(chǔ)存容易、儲(chǔ)存時(shí)間較長(zhǎng)
缺點(diǎn):有安全性的顧慮，就是有基因突變之可能
DNA疫苗研究的疾病:流感、HIV、狂犬病、B肝、新城雞瘟、瘧疾...
次單位疫苗(subunit vaccine)
目前次單位疫苗的產(chǎn)品包括第三代的B肝疫苗
製備方法:
從病原俊基因體中選值此抗原蛋白質(zhì)的基因，然后利用遺傳工程技術(shù)，將此蛋白基因送入大腸桿菌中，大量生產(chǎn)抗原蛋白。接著收集、破壞大腸桿菌來進(jìn)行抗原蛋白的純化最后在製成疫苗。
優(yōu)點(diǎn):安全性高、智被技術(shù)容易採集
缺點(diǎn):免疫效果差
減毒性活菌疫苗
目前的產(chǎn)品:口服沙賓、痲疹、德國(guó)麻疹、卡介苗、狂犬病
致病基因剔除法:利用基因工程技術(shù)將病原菌的治病基因(virulence factor)剔除。(遺傳工程)
篩選自發(fā)性的突變病原菌→只是找出突變的病源菌(致病力降低)
三、請(qǐng)解釋下列專有名詞？
（1） 南方墨漬雜交法（Southern Blot）
我通常都念'南方墨點(diǎn)法"。
實(shí)用對(duì)象是DNA，DNA經(jīng)過膠體電泳分開之后，將洋菜澆上的DNA轉(zhuǎn)印到硝化薄膜上(此技術(shù)稱Southern transfer)，再以互補(bǔ)的DNA當(dāng)作探針(probe,以標(biāo)定有放射性元素或者螢光分子)進(jìn)行雜交分析，利用放射性或螢光找出特定DNA片段。
（2） DNA晶片（DNA Microarray）
又稱"Bio-chip、gene chip, DNA chip,"就是將生物細(xì)胞內(nèi)的大分子例如:DNA、Antibody....甚至cell等(當(dāng)作探針)，用微面積、高密度的方法精確點(diǎn)制在玻璃片或者 Nylon膜...等之固體材料上，然后將sample(帶有基因序列且有標(biāo)記上螢光)與晶片雜交(hybridization)反應(yīng)，之后就可以利用去判讀正�；蚺c不正�；�(或許是捱化、疾病....)的表現(xiàn)之異同(可能過表現(xiàn)或者表現(xiàn)削弱)
DNA晶片的應(yīng)用范圍廣泛，可應(yīng)用于疾病診斷及一些專業(yè)的的研究上等等。
（3） 晶片式全基因體定量分析技術(shù)
（Array Comparative Genomic Hybridization）
（4） 單一核苷酸多型性（Single Nucleotide Polymorphisms; SNPs）
就是，在基因體上某些位置，各種的核甘酸都可能出現(xiàn)，發(fā)生率超過1%。
每個(gè)人的基因體DNA之30一個(gè)鹼基對(duì)中，影99.9%是相同的，僅存在0.1%之差異，其中最主要就是SNPs。平均每1000歌鹼基對(duì)就會(huì)出現(xiàn)一個(gè)SNP，固人類基因體中約有300萬個(gè)SNPs。
大多數(shù)的差異只造成個(gè)體的間的差異，卻不會(huì)對(duì)個(gè)體的生存造成影響，但是也有的差異會(huì)造成嚴(yán)重的生理異常或者疾病。
SNP可以作為疾病的預(yù)測(cè)、疾病的診斷、疾病的預(yù)防、疾病的治療、體質(zhì)判斷、藥品開發(fā)之依據(jù)。
（5） 基因序列考貝數(shù)多型性（Copy Number Polymorphisms; CNPs）
就是呈現(xiàn)人類基因體的變異
Array Comparative Genomic Hybridization
每個(gè)點(diǎn)都是由對(duì)應(yīng)特定染色體的位置的BAC進(jìn)行DOP-PCR製作。這個(gè)方法提供更好的解析度，期限制就是可供取用的BAC數(shù)量，染色體區(qū)段必須在BAC中，才會(huì)被點(diǎn)在為陣列上。