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本文標(biāo)題："關(guān)于顯微鏡下原生質(zhì)體的外觀"

關(guān)于原生質(zhì)體

    * 滲透壓的關(guān)鍵：原生質(zhì)體是一個(gè)具有細(xì)胞膜，但不具細(xì)胞壁的植物細(xì)胞。由于原生質(zhì)體沒有細(xì)胞壁，故其對(duì)滲透壓的改變是非常敏感的，而且必須儲(chǔ)存在一個(gè)等滲的溶液，來防止其破裂。高滲的溶液將導(dǎo)致原生質(zhì)體縮小。

    * 原生質(zhì)體的外觀：原生質(zhì)體是呈圓球形的，明顯的三度空間結(jié)構(gòu)且獨(dú)立地漂浮在溶液內(nèi)。葉綠體可能被液泡推向相反的一個(gè)小區(qū)域（液泡膜無法顯微鏡下見）。原生質(zhì)體的大小一般而言是一致的。但不同的組織來源及不同的滲透壓溶液可能會(huì)導(dǎo)致原生質(zhì)體的大小不一。比較原生質(zhì)體的大小和未處理的葉子單位面積的細(xì)胞大小。

    * 組織來源：各種植物組織可提供產(chǎn)生原生質(zhì)體的細(xì)胞。這個(gè)方法已成功地應(yīng)用在茄科植物（Solanaceous）（馬鈴薯和蕃茄的家族）的葉肉細(xì)胞上。原生質(zhì)體也可以懸浮培養(yǎng)的方法來分離（單一細(xì)胞懸浮在溶液中成長）。亦有癒合組織培養(yǎng)（癒合組織是未分化的組織），胚囊、根和幼苗的培養(yǎng)。具有薄的表皮組織最適合做為原生質(zhì)體製備的材料。

    * 可能的延伸：將原生質(zhì)體放在不同（已知的）滲透壓溶液中，學(xué)生可稀釋緩沖溶液（0.625M）來獲得一個(gè)細(xì)胞可容忍的滲透溶液。

a.嘗試去決定原生質(zhì)體可能的直徑（diameter）范圍。

b.嘗試去決定原生質(zhì)體內(nèi)的滲透壓濃度。

c.比較在相同的滲透壓溶液下，原生質(zhì)體和植物細(xì)胞的不同。

為什么這實(shí)驗(yàn)要提出植物可容忍不同滲透壓和其脫水的能力？請(qǐng)比較植物和動(dòng)物之間容忍各種滲透壓和脫水的情形。比較陸生植物或水生植物和動(dòng)物間細(xì)胞內(nèi)水分調(diào)節(jié)的不同適應(yīng)情形。

接下來是原生質(zhì)體的滅菌工作：全部的步驟都要用滅菌的設(shè)備。關(guān)于滅菌的設(shè)備及葉片的表面滅菌指導(dǎo)可顯微鏡下surface sterilization of biological materials。接著下面的步驟。

1.用滅菌過的棉布【注：尼龍網(wǎng)較好用】，過濾原生質(zhì)體及葉片的懸浮液至50ml圓錐形離心管。先用5~10ml滅菌過的mannitol（不加酵素），潤濕培養(yǎng)盤，并同樣地潤濕棉布過濾器。然后過濾原生質(zhì)體到離心管。

2.小心地離心（75Xg，2min），用滅菌過的pipette吸取原生質(zhì)體懸浮液。

比較四個(gè)界之間的細(xì)胞壁（全部的細(xì)胞都有細(xì)胞膜）：

動(dòng)物：無細(xì)胞壁；細(xì)菌：細(xì)胞壁有連結(jié)性的蛋白質(zhì)和多醣類；酵母菌（菌類）：為具多醣類及幾丁質(zhì)的細(xì)胞壁；植物：具纖維素的細(xì)胞壁（多醣類）包埋在其他多醣類和蛋白質(zhì)的基質(zhì)中。細(xì)胞壁的厚度隨著植物細(xì)胞的年齡和不同組織而不同。

預(yù)防措施：

1.假如你只要觀察原生質(zhì)體，那么精細(xì)的滅菌設(shè)備是不需要的，這個(gè)步驟可以不必使用酒精。

2.利用原生質(zhì)體做轉(zhuǎn)殖的準(zhǔn)備，則需要無菌設(shè)備的使用。即需要酒精和火的使用。

3.酒精是易燃的，要小心地使用。