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本文標(biāo)題："重建三度空間影像上的能力優(yōu)于現(xiàn)有的共軛焦顯微鏡"

重建三度空間影像上的能力優(yōu)于現(xiàn)有的共軛焦顯微鏡
為了解決現(xiàn)存的問(wèn)題，Bewersdorf的研究團(tuán)隊(duì)針對(duì)九種對(duì)SNAP-tag及CLIP-tag蛋白質(zhì)具有高親和力并對(duì)細(xì)胞膜具高通透性的小分子螢光體進(jìn)行篩選。以?xún)煞N螢光染劑ATTO647N及Chromeo-494對(duì)HEK293細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞膜染色，其STED顯微鏡所得的細(xì)胞膜影像厚度分別為78及82nm，遠(yuǎn)優(yōu)于共軛焦顯微鏡所得的320及239nm。研究團(tuán)隊(duì)亦利用EGF-CLIP-ATTO647N及 EGFR-SNAP- Chromeo-494的交互作用模型，在受體－配體結(jié)合后，細(xì)胞進(jìn)行內(nèi)噬作用時(shí)，同步擷取EGF和EGFR在細(xì)胞內(nèi)、外的運(yùn)動(dòng)影像，完成了首例STED 顯微鏡的活細(xì)胞連續(xù)雙色螢光套色影像處理。

在STED顯微鏡系統(tǒng)方面，Bewersdorf的研究團(tuán)隊(duì)?wèi)?yīng)用自行開(kāi)發(fā)的系統(tǒng)，此一系統(tǒng)在重建三度空間影像上的能力優(yōu)于現(xiàn)有的共軛焦顯微鏡，可以進(jìn)行小于100nm厚度的?切掃瞄。這項(xiàng)技術(shù)的發(fā)展，對(duì)于追?奈米微粒在細(xì)胞內(nèi)的分佈大有助益，過(guò)去一些無(wú)法以傳統(tǒng)光學(xué)顯鏡觀(guān)察到的細(xì)胞內(nèi)微小胞器的生理反應(yīng)現(xiàn)像，在新的STED顯微鏡系統(tǒng)下將一一現(xiàn)形。研發(fā)團(tuán)隊(duì)已為此STED顯微鏡系統(tǒng)申請(qǐng)專(zhuān)利