在電生理實(shí)驗(yàn)的部份,我們要紀(jì)錄螯蝦(crayfish)逃跑神經(jīng)(Lateral Giant(LG)) 的靜止電位及興奮性突觸后極化電位(excitatory postsynaptic potentiation (EPSP). 為了要有狀況良好的神經(jīng)及完整的LG迴路,我們先練習(xí)如何避免在解剖的過(guò)程中傷害到突觸間的連結(jié).熟練后儘量縮短解剖的時(shí)間,避免燈光的照射產(chǎn)熱使神經(jīng)的活性降低及膜的表面發(fā)生變化,不利玻璃電極的穿刺.
原理:
細(xì)胞會(huì)因?yàn)閮?nèi)外離子濃度不等加上各種離子通道的作用,造成細(xì)胞膜內(nèi)外有微量的電位差,可以想像有一層正電離子或負(fù)電離子的薄膜分布在細(xì)胞的內(nèi)外表面。在無(wú)刺激的情形下,神經(jīng)元細(xì)胞的靜止電位(resting potential)約為-70mV。一但受到夠強(qiáng)烈的刺激,神經(jīng)細(xì)胞可以藉由動(dòng)作電位(action potential)的產(chǎn)生長(zhǎng)途傳遞膜電位的變化。當(dāng)兩個(gè)神經(jīng)元藉由突觸(synapse)相接,訊息便可以由前一個(gè)神經(jīng)元傳給下一個(gè)神經(jīng)元。在解剖得到的螯蝦逃跑神經(jīng)迴路中我們可以清楚的看到primary afferent及LG。若將內(nèi)含3MKCl電阻值為0-15MΩ的玻璃電極插入LG軸突的起始體節(jié)內(nèi),將成對(duì)的銀線電極置于N234(primary afferent nerves)處,施加適當(dāng)強(qiáng)度的電刺激,就可以記錄到EPSPs﹔由于刺激傳遞所經(jīng)的途徑不同造成反應(yīng)產(chǎn)生的時(shí)間差,我們可以觀察到α和β兩種 EPSPs。若將刺激電極置于第五及第四神經(jīng)節(jié)之間給予適度的刺激,可紀(jì)錄到LG與MG的主動(dòng)電位(action potential)。
解剖剪刀 / 鑷子 / 解剖盤 / 固定針 / Head Stage / 電極(Electrode) / 放大器(Amplifier/Filter)) / 訊號(hào)產(chǎn)生器(Stimulator) / 類比/數(shù)位轉(zhuǎn)換器(Analog/digital Converter) / 示波器(Oscilloscope) / 電腦(Computer) / 解剖顯微鏡 / 三向微細(xì)操作儀