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1.將螯蝦置于冰上麻醉
2.剪去頭胸部,再沿U字型剪去背殼 *Note:沿著殼與肌肉中間的空隙剪去附著于殼上的肌肉
3.將蝦尾用固定針固定于解剖盤上,倒入螯蝦生理緩沖液,鑷起大團(tuán)肌肉,找到附于腹部底部中央的神經(jīng)之后,小心沿著神經(jīng)剪斷與肌肉中間的連結(jié)處,使神經(jīng)裸露
4. 格外小心處理接近第六個(gè)神經(jīng)節(jié)(G6)的部份,在剪去神經(jīng)上方的肌肉時(shí)儘量不要拉扯或剪到N2,N3,及N4,只要使其裸露一小截將來(lái)可以用電刺激即可
5. 將解剖得到的螯蝦神經(jīng)(蛙卵)置于
顯微鏡下。
6. 裝置好玻璃電極,于視野下找到電極針頭,浸入液面后將電位顯示調(diào)整歸零。
7. 于視野下將刺激銀線微靠于afferent上方。
8. 調(diào)整針頭位置,轉(zhuǎn)動(dòng)manipulator的細(xì)調(diào)節(jié)輪使針頭接近細(xì)胞膜表面。
9. 用瞬間刺激(buzz in)或輕敲電極上方使電極進(jìn)入神經(jīng)元細(xì)胞。
10. 直接讀取或開(kāi)啟電腦程式紀(jì)錄靜止電位。
11. 調(diào)整適當(dāng)之刺激伏特?cái)?shù)刺激并記錄EPSP或action potential。
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