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酵母菌單倍體細(xì)胞夾層培養(yǎng)分析圖像
顯微鏡
夾層培養(yǎng)法
先在培養(yǎng)皿里倒入一層不含菌的基本培養(yǎng)基,待冷凝以后,加上一層
含菌的基本培養(yǎng)基,冷凝后再加上一層不含菌的基本培養(yǎng)基。經(jīng)培養(yǎng)出
現(xiàn)菌落后,在培養(yǎng)皿底部把菌落儆上標(biāo)記,然后在基本培養(yǎng)基上加一層
完全培養(yǎng)基,再經(jīng)培養(yǎng)以后出現(xiàn)的菌落多數(shù)是營(yíng)養(yǎng)缺陷型。上下兩層基
本培養(yǎng)基的作用,是使菌落夾在中間,免于細(xì)菌的移動(dòng)或?yàn)橥耆囵B(yǎng)基
所沖散
實(shí)驗(yàn)通過酵母菌單倍體細(xì)胞的分離、酵母菌單倍體細(xì)胞的群體雜交
、根霉接合孢子的形成三個(gè)實(shí)驗(yàn),以了解脖母菌的生活史,觀察微生物
的有性生殖過程,初步掌握微生
物雜交育種的方法。
酵母菌單倍體細(xì)胞的分離
酵母菌的雜交育種或原生質(zhì)體融合育種均需要單倍體細(xì)跑,對(duì)于酵母
菌單倍體細(xì)胞的獲得,可以借顯微操作器的玻璃微針解剖子囊取出孢子
,也可通過酶解子囊使子囊破除,子囊孢子散出,然后用熱處理法殺死營(yíng)
養(yǎng)細(xì)胞,再經(jīng)分離、培養(yǎng)而獲得單倍體細(xì)胞,這種徒手分離酵母單倍體
細(xì)胞的方法,對(duì)不具備顯微操作器的單倍更有現(xiàn)實(shí)意義。獲得了單倍體
細(xì)胞后,再用物理或化學(xué)誘變劑處理,對(duì)其進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)標(biāo)記或其他標(biāo)記。
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