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抗原微粒
顯微鏡下可見(jiàn)細(xì)菌細(xì)胞分析顯微鏡
在水質(zhì)污染菌的調(diào)查研究中,需要確定污染細(xì)菌的種類(lèi)或類(lèi)型時(shí),僅僅
用生理生化方法鑒定還不夠,特別是對(duì)腸桿菌科的一些細(xì)菌的檢驗(yàn)有必
要借助免疫學(xué)反應(yīng)進(jìn)一步作種間與種內(nèi)的鑒別。
這是由于此種免疫血清中含有結(jié)合性的物質(zhì)y-球蛋白,稱(chēng)為抗體,與
此相對(duì)應(yīng)的異構(gòu)物則稱(chēng)為抗原。用于微生物鑒定的抗原物質(zhì)是位于微
生物體表,如鞭毛、莢膜、細(xì)胞壁的多糖類(lèi)等。鞭毛抗原稱(chēng)為H抗原,莢
膜抗原稱(chēng)為K抗原,細(xì)胞壁抗原為O抗原抗原和抗體的結(jié)合具有嚴(yán)格的特
異性,則可用已知抗體檢?未知抗原,常用已知的免疫血清來(lái)鑒定未知的
污染水中的病原菌。此類(lèi)反應(yīng)是在體外進(jìn)行。如在試管中,通常由于抗
原的物理狀態(tài)不同(顆粒性或可浴性)和參加反應(yīng)的輔助因素不同(如補(bǔ)
體、電解質(zhì)),以及操作方法的不同,常可
沉淀反應(yīng)的試驗(yàn)
此反應(yīng)與凝集反應(yīng)相似,都是抗原微粒在電解質(zhì)的環(huán)境中,由于與
抗體的作用而集結(jié),不同的是抗原的大小不致。在凝集反應(yīng)中,抗原微
粒是顯微鏡下可見(jiàn)的細(xì)菌細(xì)胞而沉淀反應(yīng)中的抗原微粒呈膠體狀態(tài),其
大小接近分子水平。沉淀反應(yīng)比凝集反應(yīng)的靈敏度高,特異性更強(qiáng),故
有些鑒定工作用沉淀反應(yīng)更合適。鑒定方法如下
①用生理鹽水將待測(cè)菌制成濃菌液,立即加0,5%苯酚防腐.放入冰箱
內(nèi)保存6星期,每天搖動(dòng)1―2次。
②取保存的菌液離心,去沉淀物,得清凈透明的細(xì)菌蛋白質(zhì)提取液
⑧將0,1毫升完全澄清的抗血清(或其適當(dāng)?shù)南♂屢?加到6×25毫米
的小試管中
④取待測(cè)菌的蛋白質(zhì)提取液(即抗原)0.1毫升,小心地注入管內(nèi),使其
在抗血清上面成為另一液層。如果在5一15分鐘內(nèi)于兩液界面上形成一
個(gè)白色沉淀環(huán),則為陽(yáng)性反應(yīng)。所以此種反應(yīng)也稱(chēng)環(huán)狀沉淀反應(yīng)在此試
驗(yàn)法中的血清使用量不變,而抗原則必須稀釋,
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