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注意事項
①應定檢查保存處的溫度、濕度、各試管上的棉塞有無長霉菌。若有
異常,必須取出異常管,重新移植培養(yǎng)后,補上空缺。
②保存的數(shù)量較多,每次移植時,對每株的菌號、所用的培養(yǎng)基一定要
核對準確無誤。發(fā)現(xiàn)差錯應即時糾正。
⑧每次移植后,應與原保存的菌株和菌種順序號卡逐管一?對,重新檢
驗其培養(yǎng)特征,確定無誤后再行存放
④以斜面形式保存的菌種,一般每株須保藏相繼三代的
培養(yǎng)物較適宜,以便作對照。
液氮保藏法
此法是把細胞懸浮在分散劑(保護劑)中,或是在瓊脂培養(yǎng)基上培養(yǎng)好
的菌體直接進行液體冷凍,而后移至液氮(-190°C)或其氣相中保藏。
故此法能彌補前面的低溫保藏法之不足,特別對于低溫生長的水生微生
物,如嗜冷微生物、海洋微生物更適合,對其他各種細菌、放線菌,真菌
病毒和噬菌體等也適用。因此本法適用范圍最廣,是較理想的微生物保
存方法。
將熔封良好的安瓿裝入罐?進行綏慢冷凍操作,應用此法保存微生物
,其存活率的高低受降溫過程時的冷凍速度影響很明顯。若將細胞急劇
冷凍,則在細胞內(nèi)形成冰的晶體,當溫度上升時,晶體狀態(tài)發(fā)生變化,導
致微生物死亡,降低存活率。為盡可能使冰的結(jié)晶在胞外形成,一般都
采用緩慢冷凍操作,把溫度降低速度控制在1分鐘1度左右,使樣品溫度
降低至近25-30°C時,隨即將樣品移至液氮中,或者在20一-25°C冰箱
中30―60分鐘,慢慢冷凍而后放入液氮速凍。放入后,使溫度急劇下降
而原封不動地保藏在該處。但要經(jīng)常注意液氮的殘存量,定期補添,使
液面保持一定水平。
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