計(jì)算反應(yīng)速率
1. 針對(duì)每個(gè)樣本,劃出以OD405吸光值為y軸,時(shí)間點(diǎn)為x軸的圖形。計(jì)算出圖形的斜率 (應(yīng)為線性) S以每分鐘多少OD405吸光值為單位。(或以Excel軟件計(jì)算)
2. 每個(gè)樣本的反應(yīng)速率R (每OD600吸光值單位每分鐘產(chǎn)生多少奈穆爾的產(chǎn)物)**即為:
R = S / (0.02 x V x OD600)
V是所分析的樣本體積以毫升計(jì)。在本例中,V為0.02ml;因?yàn)橛诓襟E3中使用0.2ml樣本于初始反應(yīng),而其中的十分之一 (100微升)于每個(gè)時(shí)間點(diǎn)取出并加入終止溶液(步驟4) 。分母中的0.02是由p-nitrophenol的穆爾消失系數得來。在本特殊方法所描述的狀況下,p-nitrophenol的穆爾消失系數為18000。在900微升的最終體積之下,0.02吸光值代表1奈穆爾的產(chǎn)物生成。