結果與討論
相鄰的枯草桿菌細胞可以互相交換細胞質中的物質
顯微鏡首先使用染色體中帶有綠色螢光基因 (gfp)的枯草桿菌細胞 SB444,與缺
乏 gfp 的 PY79 共同培養(yǎng)在固體培養(yǎng)基上,之后使用螢光顯微鏡觀察。結果發(fā)
現從 gfp+細胞所在的位置到 gfp-細胞,綠色螢光呈現梯度下降,涵蓋的范圍約
有 40 M (圖 1Ab,1B);當將綠色螢光與 phase contrast 影像重迭后,發(fā)現綠色
螢光梯度只存在于有細胞的位置 (圖 1Ac)。接著顯微鏡使用 time-lapse
microscopy 觀察單一細胞層次,在 T0 分鐘時只有 gfp+細胞所在位置有偵測到
綠色螢光 (圖 1Ca);30 分鐘過后,gfp+細胞附近的 gfp-細胞也開始出現微弱的
螢光訊號 (圖 1Cb);并且,螢光強度與距離 gfp+細胞的遠近呈現函數關係 (圖
1D)。接著,顯微鏡使用 Calcein 進行測試。Calcein 為十分親油性物質,能夠輕
易穿越細胞膜 但一旦進入細胞后就會被細胞質中的 esterases 水解成親水性物
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質,而被侷限在細胞質中。顯微鏡首先將 PY79 與 calcein-AM 一同培養(yǎng),之后再
與未標定的細胞溷合。于 t0 分鐘時只有被標定的細胞可偵測到螢光強度 (圖
2A,2A’);但隨著時間增長,原先未被標定的細胞也開始出現螢光訊號 (圖
2B,2C);而在 t30 分鐘時幾乎所有未被標定的細胞都可偵測到螢光訊號,但一
開始被標定的細胞其螢光訊號有減弱的現象 (圖 2C,2C’)。