不同溫度、果徑、接種源濃度及傷口之有無(wú)對(duì)發(fā)病的影響實(shí)驗(yàn)方法！

選取PP-1菌株經(jīng)PDA于25℃培養(yǎng)10天后,以無(wú)菌水洗下分生孢子,調(diào)成2.75X106／ml濃度孢子懸浮液,并添加0.02％的Tween20。以80mm以上相等果徑之果實(shí)進(jìn)行病原性測(cè)定,將前述孢子懸浮液噴于果面,套以塑膠袋保溼,放置15-35℃(間隔5℃)定溫箱,各溫度接種5個(gè)果實(shí),2重複。另以無(wú)菌水噴溼者為不接種對(duì)照組;經(jīng)10日后調(diào)查發(fā)病度。以大(80-95mm)、中(41-79mm)、小(40mm以下)果徑果實(shí)進(jìn)行病原性測(cè)定,每一溫度接種10個(gè)果實(shí),同上述方法接種并放置于25℃經(jīng)10日后調(diào)查發(fā)病率。以80-95mm果徑之果實(shí)進(jìn)行傷口有無(wú)測(cè)定發(fā)病,將果位按縱向分為上、中、下等部位,再區(qū)分為有無(wú)傷口處理及人工接種與否,以襯墊摩擦造成定點(diǎn)傷口,接種浸有前述孢子懸浮液之濾紙環(huán),貼上透明膠帶,套以塑膠袋保溼,對(duì)照組之濾紙環(huán)則浸無(wú)菌水,放置25℃定溫箱,各接種10個(gè)果實(shí),經(jīng)10日后調(diào)查發(fā)病率。將接種源濃度系列稀釋成107–101conidia／ml,同上述方法,各濃度接種4果實(shí),各2重複,接種10日后調(diào)查發(fā)病度。發(fā)病度=(7A＋5B＋3C＋D＋0E)∕(7X調(diào)查果數(shù))。其中A:病斑分佈在果實(shí)1∕2以上面積者,B:病斑分佈在果面1∕4-1∕2,C:病斑分佈在果面1∕8-1∕4,D:病斑分佈在果面1∕8以下,E:無(wú)病斑。