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本文標題："如何試著去看PBS和DMEM是否污染？"
新聞來源：未知 發(fā)布時間：2012-4-3 1:07:56 本站主頁地址：http://www.y7853.cn
我的問題是最近忽然間發(fā)生的...
我養(yǎng)的細胞是乳癌細胞株MCF-7，使用DMEM/F12培養(yǎng)，本身不加抗生素，
然而因為細胞株是Tet-off system，所以有在maintain中加入2μg/ml的Doxycycline（Dox）
在實驗起始時以PBS wash 而后分成有Dox與單純以DMEM/F12無抗生素者培養(yǎng)，誘導(dǎo)目標蛋白表現(xiàn)...
----以上是常態(tài)培養(yǎng)情形
問題：
我上次是有發(fā)現(xiàn)我實驗起始后誘導(dǎo)到一半（全程應(yīng)6天，但發(fā)生在第3天）
細胞會長得很快，而后就死了，DMDM/F12都變成黃色的，但是是澄清的，
細胞在盤底呈現(xiàn)一種白云狀（就是形狀很像一塊一塊的白云，但沒有飄起來），
如果去移動dish，這時細胞就會飄起來，使medium變成沙沙的，
這時候因為移動dish鏡檢有晃到，medium就變成混濁的了。
但是有含Dox的那一組則很正常（看起來）
（那時我懷疑是自己一開始種太多，而抗生素會稍微影響細胞生長，誘導(dǎo)需6天，可能因此dish太滿）
于是我重新按照一樣的方法再作一次，發(fā)現(xiàn)一模一樣的事又發(fā)生了，
心里很毛，所以重新解凍了，
新的細胞我解凍看起來很正常，貼的很好，繼代一次之后，
我試著種較少細胞數(shù)，但隔天去看卻發(fā)現(xiàn)細胞不對勁，
我養(yǎng)的8盤DMDM/F12一樣都變成黃色的（但是澄清），
細胞在盤底再次呈現(xiàn)一種白云狀，
移動dish鏡檢有晃到，medium就變成混濁的了。
鏡檢的時候看到的是有點霧霧的，只有少量細胞貼在上面。
請問各位先進，
這是代表什么種類的污染？是漿霉菌嗎？
或者有什么簡易的方法可確定？
另如何試著去看PBS和DMEM是否污染？
回復(fù)：
是水黴，PBS、DMEM、細胞培養(yǎng)箱都得檢查清洗
建議你不要去試了 可能有問題的通通扔掉
直接重配medium 重新解凍細胞吧!
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