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細(xì)菌的觀察與培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)?zāi)康脑砗筒襟E!活細(xì)菌觀察用
顯微鏡哪有賣?
(一)目的
把實(shí)驗(yàn)用于日常生活中, 以不同來(lái)源的水質(zhì)樣品作材料,檢測(cè)水中微生物的數(shù)目與種類,并由培養(yǎng)結(jié)果中觀察各種細(xì)菌的菌落型態(tài)。由單一個(gè)細(xì)菌分裂,繁殖而形成的細(xì)菌族群稱為菌落(colony),不同種類的細(xì)菌所形成的菌落形態(tài)也各不相同,其形態(tài)指標(biāo)包括菌落的大小、顏色、氣味、表面光滑或粗糙、邊緣平整或呈鋸齒狀,是否有黏液。因此同學(xué)們可以從中了解表面的巨觀判斷與顯微鏡下的觀察作一比較。
(二)原理
本實(shí)驗(yàn)主要是希望同學(xué)學(xué)習(xí)和熟悉生命科學(xué)實(shí)驗(yàn)中最基本的微生物操作技術(shù)與方法,了解滅菌、無(wú)菌操作、分離方法、純系培養(yǎng)、染色鑑定與計(jì)數(shù)的方法。這些技術(shù)將是未來(lái)微生物學(xué)、分子生物學(xué)等等實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)。
(三)材料 / 設(shè)備 / 藥品
Bacto-tryptone
Bacto yeast extract
NaCl
(四)步驟
1. 樣品水洗以振盪混合器(vortex mixer)搖勻。
2. 以pipetman(微量吸管)吸取0.1ml的水滴在培養(yǎng)基上。
3. 浸在酒精中消毒的抹棒先滴掉大部分酒精,再以火焰燒去剩馀的酒精。
4. 抹棒放涼后,把培養(yǎng)基上的水液涂抹均勻。
5. 在培養(yǎng)皿底部標(biāo)明組別及水的樣品來(lái)源。
6. 培養(yǎng)皿的底部朝上,在32℃培養(yǎng),隔日觀察。觀察項(xiàng)目包括培養(yǎng)皿上的菌落數(shù)與菌落形態(tài)。
7. 有興趣的同學(xué)取不同菌落的細(xì)菌作成抹片后,染色觀察。(方法如第一部分所述)
(五)注意事項(xiàng)
1. 微量吸管的旋轉(zhuǎn)鈕為調(diào)整體積之用, 因應(yīng)實(shí)驗(yàn)需要調(diào)到100μl(即0.1ml)處,可由刻度窗上看到。其上方按鈕是取放液體時(shí)使用,在吸取液體時(shí)先在外面壓到第一段之后在伸入液體中取樣,取樣時(shí)的動(dòng)作不可以過(guò)大,以免液體上噴后污染微量吸管。為將液體壓出,必須將按鈕壓到第二段,才能把吸入的液體完全排出,第一段與第二段按鈕的感覺(jué)可在操作前先行熟悉(旁邊的按鈕則為丟棄吸頭之)。
2. 使用完后抹棒直接放入酒精杯中,不要經(jīng)過(guò)火焰,以免引起杯中酒精燃燒。
3. 所有標(biāo)注字體應(yīng)寫于底部(有培養(yǎng)基的那部分),以免因蓋錯(cuò)蓋子而得錯(cuò)誤結(jié)果。
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