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本文標(biāo)題："精子耐熱性測試!精子檢測顯微鏡價(jià)格！"
新聞來源：未知 發(fā)布時(shí)間：2012-5-23 1:20:44 本站主頁地址：http://www.y7853.cn
精子耐熱性測試!精子檢測
1.公羊精子先以稀釋液稀釋至 100-200 × 10
6 濃度，取 1ml 置入 1.5ml 微量離心
管中，蓋緊上蓋。
2.置入 37-38℃恒溫水浴槽中。
3.分別測定放入前、放入后每隔 1 小時(shí)直至 6 小時(shí)之精子存活率與活動力。
（九）精子尾膜完整性（低滲膨脹試驗(yàn)）評估
1. 低滲透壓溶液配制
成分
重量或容量
Tri-sodium-citrate
0.735
公克
Fructose
1.351
公克
二次蒸餾水
定量至 100 毫升
2.取原精液 50μl（0.05 ml）加入 1 ml 低滲透壓溶液中，混勻。
3.置入 37-38℃恒溫水浴槽中 60 分鐘。
4.取出 5μl 稀釋精液置于載玻片上并覆上蓋玻片
5.判讀：精子在顯微鏡下若呈現(xiàn)膨脹且捲曲之尾部，即表示該精子尾膜是完整的。
（十）頭帽完整性評估（FITC-PNA 法）
1.于載玻片滴上 1 滴約 15-20μl 稀釋精液。
2.用另一載玻片或蓋玻片進(jìn)行抹片制作，抹片需儘量平均與薄層。
3.乾燥。
4.將玻片以絕對甲醇固定 15 分鐘，乾燥。
5.將含 FITC-PNA（50μg/ml）之 PBS 溶液均勻滴在抹片上，置于飽和濕氣的空
間中，室溫靜置 10 分鐘。
6.緩慢用清水洗去抹片上未結(jié)合之 FITC-PNA 分子溶液。
7.于螢光顯微鏡下進(jìn)行觀察與判讀。若精子頭帽有完整的綠色螢光表示頭帽完
整，反之則為不完整之頭帽。
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