微生物進(jìn)行革蘭氏染色時應(yīng)注意的事項為何?
1. 染色時,脫色過度時可使初染流失,使革蘭氏陽性菌成為革蘭氏陰性菌,但脫色不足不能完全去除複合物,結(jié)果是革蘭氏陰性菌變成革蘭氏陽性菌
2. 將載玻片以二段水充分清洗,以除去剩馀之染液
3. 宜使用未超過24小時之新鮮培養(yǎng),因菌齡老化,尤以革蘭氏陽性菌易失去保留出染之能力,而顯示出錯誤的結(jié)果。且部分菌體染成紫色部分成紅色。
6、 說明如何配置革蘭氏染色使用的(1)結(jié)晶紫(2)碘液(3)沙番紅 三種染劑
(1) 結(jié)晶紫:
溶劑a:結(jié)晶紫(2.0g) + 95%酒精(20.0ml)
溶劑b:草氨酸(0.8g) + 蒸餾水(80.0ml)
將a、b溶液充分混合。
(2) 碘液:
碘(1.0g) + 碘化鉀(2.0g) + 蒸餾水(300.0ml)
將碘與碘化鉀一起語言缽輾碎,加入少量蒸餾水將其洗出,再加入其馀蒸餾水(共300ml)混合均勻。
(3) 沙番紅:
沙番紅(0.5g) + 95%酒精(25.0ml) + 蒸餾水(100.0ml)
取0.5g的沙番紅溶于25ml 95%的酒精中,混合完全后加入100ml的蒸餾水,再以濾紙過濾,過濾液才是實驗中所需的沙番紅。
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