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本文標(biāo)題:"傳統(tǒng)的微生物分離與鑒定方法簡(jiǎn)介!體視顯微鏡價(jià)格"

新聞來源:未知 發(fā)布時(shí)間:2012-8-25 0:32:10 本站主頁地址:http://www.y7853.cn

微生物分離與鑑定,一直以來都是生物醫(yī)學(xué)研究發(fā)展上相當(dāng)重要的挑戰(zhàn)。傳統(tǒng)的分析鑑定方法,須經(jīng)過耗時(shí)的分離、培養(yǎng)、觀察、測(cè)試等程序。我們利用奈米金屬粒子陣列,建構(gòu)一個(gè)可快速鑑測(cè)生物樣本的表面增強(qiáng)拉曼散射光譜系統(tǒng)。由于拉曼訊號(hào)以精確鑑定分子指紋,這套系統(tǒng)在蛋白質(zhì)、酵素、DNA 等生物分子的結(jié)構(gòu)與反應(yīng)動(dòng)態(tài)學(xué)研究都有許多應(yīng)用。我們可利用增強(qiáng)拉曼光譜此項(xiàng)技術(shù)來鑑定不同的細(xì)菌。將細(xì)菌置放在奈米金屬粒子陣列上,細(xì)菌細(xì)胞壁上緊貼在金屬粒子表面上的分子所產(chǎn)生的拉曼光譜訊號(hào)就是我們采到的分子指紋。不同種細(xì)菌之間細(xì)胞壁的組成會(huì)有差異,因此我們會(huì)得到不同的增強(qiáng)拉曼訊號(hào)。首先我們以格蘭氏陽性菌 (Gram-positive)、格蘭氏陰性菌(Gram-negative) 和分枝桿菌 (mycobacteria) 三大類去量測(cè)其表面拉曼散射光譜 ( 圖二 )。格蘭氏染色法是常見的細(xì)菌鑑別染色法,利用不同細(xì)菌細(xì)胞壁對(duì)于染劑結(jié)晶紫滯留的差異性,可分成格蘭氏陽性菌與陰性菌。格蘭氏陽性菌之胞壁是由厚度約 20 至 80nm 的多層肽聚醣 (peptidoglycan) 組成。相較之下,格蘭氏陰性菌則通常具有約 1-7nm 的較薄肽聚醣層,在肽聚醣層外包覆了外膜及脂多醣 (lipopolysaccharides, LPSs),整體結(jié)構(gòu)較為複雜。而分枝桿菌在許多生理特質(zhì)上是異于一般細(xì)菌,其具有富含脂質(zhì)的細(xì)胞壁又更為複雜,這使得分枝桿菌無法以一般格蘭氏染色法染色,要使用特殊的染劑以染色。而觀察其增強(qiáng)拉曼散射光譜,我們可以明顯將其分成三組不同的光譜型態(tài),并可對(duì)應(yīng)其細(xì)胞壁組成的差異性。革蘭氏陽性菌其細(xì)胞壁組成最為簡(jiǎn)單,主要由肽聚醣構(gòu)成,其光譜表現(xiàn)出來的分子振動(dòng)波峰 (peak) 最少 ; 陰性菌的細(xì)胞壁組成結(jié)構(gòu)較多,包含肽聚醣及脂多醣的分子結(jié)構(gòu),其分子震動(dòng)波峰則略有增加 ; 而分枝桿菌因其細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)最是複雜,光譜也顯現(xiàn)出最多的分子振動(dòng)波鋒。而這樣的技術(shù)也可用于細(xì)菌的即時(shí)抗藥性反應(yīng)實(shí)驗(yàn),藉由藥物破壞細(xì)菌外殼結(jié)構(gòu),立即在細(xì)菌的拉曼光譜上出現(xiàn)反應(yīng),而對(duì)藥物有抗藥性的細(xì)菌并不會(huì)有外殼結(jié)構(gòu)的損害,細(xì)菌光譜舊維持不變,快速的反應(yīng)出細(xì)菌對(duì)施加的藥物有無抗藥性,大大的縮減以往還需培養(yǎng)的時(shí)間

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