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近年來,由于分子生物技術(shù)的發(fā)達(dá),昆蟲的鑒定方法不再局限于外部形態(tài)的鑒定;目前應(yīng)用于鑒定植物害蟲之分子生物技術(shù)中,又以聚合(酉每)連鎖反應(yīng)(polymerase chain reaction, PCR)技術(shù)最為普遍被運(yùn)用,PCR技術(shù)應(yīng)用上最關(guān)鍵之要素為專一性引子對,一對可順利增幅出害蟲核酸物質(zhì)上特異性片段用以驗(yàn)明正身之引子對,配合PCR測試儀及適當(dāng)?shù)姆磻?yīng)條件,即可在數(shù)小時(shí)內(nèi)完成鑒定工作。為提昇鑒定之效率與準(zhǔn)確率,PCR技術(shù)的應(yīng)用更加多元化,包括于測試時(shí)置入多組之引子對,用以偵測兩種以上PCR產(chǎn)物之Multuplex-PCR技術(shù);或利用PCR技術(shù)中引子逢機(jī)性增幅測試物DNA片段,比對反應(yīng)產(chǎn)物電泳分析圖譜差異,鑒定其類緣歸屬之RAPD-PCR技術(shù)(逢機(jī)增幅多形性去氧核(酉唐)核酸,Random amplified polymorphic DNA);亦或?qū)CR技術(shù)所增幅出之DNA片段再利用限制(酉每)切割,經(jīng)電泳分析后比對其限制(酉每)圖譜差異,用以判別是否為同族群或同種之PCR-RFLP技術(shù)(聚合(酉每)片段多形性分析,Restriction fragment length polymorphism)等。
除了PCR技術(shù)外,目前應(yīng)用在植物害蟲鑒定上之分子生物技術(shù)尚包括同功異構(gòu)?型態(tài)分析(Isozyme patterns)、DNA指紋技術(shù)(DNA fingerprinting)、微衛(wèi)星DNA(microsatellite DNA)或迷你衛(wèi)星DNA(minisatellite DNA)之應(yīng)用、DNA定序等。此外,目前已有專家針對特定植物害蟲研發(fā)建立特定種類害蟲之專一性探針(probe),日后可配合微陣列設(shè)備(microarray)及核酸微陣列點(diǎn)樣系統(tǒng)(spotting system)制成可同時(shí)鑒定多種重要害蟲或同種不同生理小種之基因晶片(DNA chip)。
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