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本文標(biāo)題："種植的細(xì)胞玻片固定在細(xì)胞固定架-細(xì)胞顯微鏡"
新聞來(lái)源：未知 發(fā)布時(shí)間：2013-4-30 4:57:35 本站主頁(yè)地址：http://www.y7853.cn
細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)組裝
整個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)包含許多設(shè)備，因此組裝過(guò)程將影響整個(gè)實(shí)驗(yàn)的成
功與否，組裝方法：
1. 將生物反應(yīng)器、ENH 電磁式定量泵浦、血清瓶和矽膠管移入無(wú)菌操
作臺(tái)內(nèi)，鎖緊 ENH 電磁式定量泵浦本體和泵浦頭。
2. 用矽膠管連接生物反應(yīng)器與 ENH 電磁式定量泵浦頭，再以 ENH 電
磁式定量泵浦將 95%乙醇打入并循環(huán)至整個(gè)生物反應(yīng)器 30 分鐘，
已徹底滅除矽膠管內(nèi)細(xì)菌，之后使用磷酸緩衝溶液循環(huán) 30 分鐘，
沖洗系統(tǒng)內(nèi)殘馀乙醇與雜質(zhì)，完成后拆開(kāi)生物反應(yīng)器，關(guān)上出口端
針閥。
3. 將 24 小時(shí)前種植的細(xì)胞玻片固定在細(xì)胞固定架上，由培養(yǎng)室本體
下方放入，鎖上培養(yǎng)室下蓋，放入培養(yǎng)室內(nèi)槽后將細(xì)胞培養(yǎng)液加滿
鎖上培養(yǎng)室上蓋。
4. 打開(kāi)出口端針閥，以最小衝程頻率循環(huán)細(xì)胞培養(yǎng)液 10 分鐘，用以
排出生反應(yīng)器系統(tǒng)中之氣泡。到此整個(gè)生物反應(yīng)器與壓力驅(qū)動(dòng)完全
密封。
5. 將生物反應(yīng)器系統(tǒng)與壓力驅(qū)動(dòng)移出無(wú)菌操作臺(tái)，生物反應(yīng)器置于顯
微鏡溫控臺(tái)上，含細(xì)胞培養(yǎng)液之血清瓶放入由顯微培養(yǎng)箱與恒溫水
槽提供的環(huán)境內(nèi)，生物培養(yǎng)系統(tǒng)組裝完成
細(xì)胞影像處理
利用顯微鏡自動(dòng)影像擷取系統(tǒng)作連續(xù)取像，參考 Wu 找初始輪廓的步驟
找出包圍細(xì)胞影像之初始輪廓，最佳二值化影像后將初始細(xì)胞影像輪
廓外之背景去除，以減少運(yùn)算量，再利用細(xì)胞輪廓衍生成面積變化與遷移
速率，得到細(xì)胞受不同壓力刺激下物理反應(yīng)
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