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本文標(biāo)題："豬胚顯微操作技術(shù)-一般選擇立體顯微鏡(10~20倍)即可"
新聞來源：未知 發(fā)布時(shí)間：2013-5-1 18:56:10 本站主頁地址：http://www.y7853.cn
豬胚顯微操作技術(shù)-一般選擇立體顯微鏡(10~20倍)即可
體細(xì)胞保存及複制技術(shù)：
一般而言，整個(gè)體細(xì)胞復(fù)育流程可分為體細(xì)胞保種、體細(xì)胞核轉(zhuǎn)置及親緣鑑定。欲保種之種豬，
可取其耳刻組織，置于碎冰中快地寄送到保種之實(shí)驗(yàn)室，經(jīng)由無菌操作，將組織建立成初代培養(yǎng)之細(xì)胞，
所建立之細(xì)胞可簡易置于含10％DMSO之胎牛血清冷凍保護(hù)液中，置于-80℃冰箱過夜，再移至液態(tài)氮中冷凍保存，
此保種方法不僅簡易，且不限于種公豬，對具優(yōu)良繁殖性能之母豬亦可行。在體細(xì)胞核轉(zhuǎn)置(SCNT)方面，取體內(nèi)或體外成熟卵母細(xì)胞，
藉由顯微操作技術(shù)進(jìn)行卵母細(xì)胞核去除，再將供核細(xì)胞直接注射至細(xì)胞質(zhì)中，
可得重組豬胚：目前發(fā)展中之徒手法(hand made)在一般解剖顯微鏡(10~20倍)下，以徒手持刀片將豬卵對半截切，再取無極體(無卵細(xì)胞核)兩半對夾一顆體細(xì)胞進(jìn)行融合，
取得重組豬胚；再將此等重組豬胚胚移置受胚母豬輸卵管或子宮角上端內(nèi)，
待母豬完成懷孕，進(jìn)行SPF剖產(chǎn)或自然分娩複制豬只。在親緣鑑定方面，將體細(xì)胞與複制分身之基因體DNA，
進(jìn)行單核苷酸多態(tài)型與微衛(wèi)星標(biāo)記之基因型分析，即可確定與其親緣之正確性。
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