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本文標(biāo)題:"使用哪種顯微鏡可以看活細(xì)胞-細(xì)胞培養(yǎng)"

新聞來源:未知 發(fā)布時(shí)間:2013-5-5 21:47:53 本站主頁(yè)地址:http://www.y7853.cn

使用哪種顯微鏡可以看活細(xì)胞-細(xì)胞培養(yǎng)

以原子力顯微術(shù)在病毒感染細(xì)胞之形態(tài)觀察活體細(xì)胞量測(cè)技術(shù)之發(fā)展

  原子力顯微術(shù)(AFM)除具有極佳的高解析度與簡(jiǎn)單的樣本前處理之外,因也可在液相中取像,
已有許多文獻(xiàn)用來觀察微生物、細(xì)胞的微結(jié)構(gòu),亦有藉之掃描到病毒感染細(xì)胞后其表面的出芽模形態(tài),

甚至用以探討某些病毒外套膜的表面特征。本研究首先,以兼嗜性野生型小鼠白血病病毒(MMLV),
分別去感染人類膀胱癌細(xì)胞(J82)、人類肺癌細(xì)胞(A549)及老鼠纖維母細(xì)胞(NIH3T3)等三種宿主細(xì)胞,

對(duì)照性地再以親嗜性MMLV進(jìn)行宿主與非宿主細(xì)胞受感染6 hr后之細(xì)胞膜表面的觀察,黏貼于培養(yǎng)皿上的細(xì)胞樣本,

先以福馬林固定及磷酸鹽緩衝液、去離子水清洗,繼而在空氣中自然乾燥后進(jìn)行AFM掃描。結(jié)果顯示,當(dāng)NIH3T3細(xì)胞受上述兩種MMLV感染時(shí),

均在其表面上發(fā)現(xiàn)許多可能是病毒融合或細(xì)胞胞飲作用所造成的孔洞。這在J82及A549細(xì)胞受兼嗜性MMLV感染時(shí)亦被發(fā)現(xiàn),
然若是受親嗜性MMLV感染的話,則無(wú)此類似的現(xiàn)象。其次,我們也將上述的親嗜性MMLV與其經(jīng)外套膜蛋白上修飾Arg-Gly-Asp(RGD)的MMLV,
分別探討其對(duì)倉(cāng)鼠口腔癌細(xì)胞(HCDB-1)、人類微血管表皮細(xì)胞(HMEC-1)兩種非宿主細(xì)胞,以及NIH3T3宿主細(xì)胞感染能力的影響。

其結(jié)果得知,受RGD修飾之MMLV感染的HCDB-1、HMEC-1,亦會(huì)出現(xiàn)和NIH3T3之細(xì)胞膜表面上類似的凹陷及孔洞現(xiàn)象,
顯示經(jīng)修飾后的病毒可能已轉(zhuǎn)變成可對(duì)非宿主細(xì)胞具感染作用。最后,為要建立液相中病毒感染細(xì)胞的過程的觀察可能性,
我們也嘗試了在液相中活體細(xì)胞表面的掃描技術(shù)探討,并藉儀器上的力調(diào)變顯微術(shù)紀(jì)錄與力/位移曲線,
量測(cè)整個(gè)細(xì)胞表面軟硬的分佈。經(jīng)分析細(xì)胞表面各點(diǎn)的力學(xué)特性,由楊氏系數(shù)求取得知,細(xì)胞核中心部位為其周圍區(qū)域的0.05倍。

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