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本文標(biāo)題："反射式熒光顯微鏡的一些應(yīng)用-光學(xué)儀器常識(shí)"
新聞來源：未知 發(fā)布時(shí)間：2013-5-7 19:50:36 本站主頁地址：http://www.y7853.cn
單分子偵測因可呈現(xiàn)動(dòng)態(tài)行為與動(dòng)力參數(shù)的真實(shí)波動(dòng)與分布、可進(jìn)行蛋白質(zhì)反應(yīng)事件操縱與反應(yīng)之定量分析、
且反應(yīng)毋須同步，故為生物分子研究之重要且實(shí)用的方法。而所謂單分子熒光顯微術(shù)，
乃是利用適當(dāng)波長的激光，激發(fā)所選擇的熒光標(biāo)識(shí)分子，透過對熒光標(biāo)識(shí)分子的偵測與觀測，追蹤目標(biāo)分子的動(dòng)態(tài)行為。
主要是關(guān)于建立一套稜鏡式全反射顯微熒光顯微術(shù)系統(tǒng)，以進(jìn)行單分子研究。全反射顯微術(shù)成功的關(guān)鍵，
在于有效地降低背景熒光值。
全反射在界面所建立的漸逝場，其強(qiáng)度為入射光能量的數(shù)倍，并隨離界面的距離增加而呈指數(shù)性衰減，
全反射在界面所建立的漸逝場，其強(qiáng)度為入射光能量的數(shù)倍，并隨離界面的距離增加而呈指數(shù)性衰減，
其滲透深度頗為狹窄，僅侷限于界面附近0.1微米的帶狀區(qū)域，故能選擇性激發(fā)臨近界面的熒光分子。
漸逝場中的熒光標(biāo)記分子經(jīng)激發(fā)所放出的熒光訊號(hào)，經(jīng)高數(shù)值孔徑的物鏡收集后，
分別以電荷耦合元件（CCD）及雪崩式光二極體（APD）偵測。電荷耦合元件的優(yōu)點(diǎn)在于空間的解析與多個(gè)單分子資訊的同時(shí)擷取，
雪崩式光二極體的優(yōu)點(diǎn)在于時(shí)間解析度，可用于單頻道或雙頻道的光子計(jì)數(shù)，以進(jìn)行時(shí)間系列的解析。
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