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本文標(biāo)題:"CCD影像分析-小工件影像測量工具顯微鏡"

新聞來源:未知 發(fā)布時(shí)間:2013-5-7 19:52:25 本站主頁地址:http://www.y7853.cn

針對ATP合成酶,本實(shí)驗(yàn)選擇CyDye作為熒光標(biāo)記分子,包括Cy3及Cy5,
并采用532nm綠光激光作為Cy3的激發(fā)光源。


將濃度在10~100pM等級(jí)的CyDye洋菜溶液,旋鍍制成含水達(dá)99%的洋菜膠體薄膜以進(jìn)行系統(tǒng)測試。測試的結(jié)果,無論是CCD影像分析,
或是APD光子計(jì)數(shù)量測,均顯示本實(shí)驗(yàn)所建立的稜鏡式全反射顯微熒光顯微術(shù)系統(tǒng),確實(shí)具有進(jìn)行單分子研究的能力,

其中最主要的證據(jù)系Cy3單分子單一步驟光淬滅的行為。

實(shí)驗(yàn)的背景熒光值僅每秒約20個(gè)單光子,訊號(hào)背景比值平均在13左右,最高達(dá)20,且咸信仍有提升空間。

在本實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)的觀測下,Cy3熒光單分子在發(fā)生光淬滅之前,約可產(chǎn)生100,000~1,000,000個(gè)光電子訊號(hào)。 


  單分子實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)確立后,未來將可以生物馬達(dá)為主角,
進(jìn)行單分子動(dòng)態(tài)行為分析與動(dòng)力學(xué)研究,包括以Cy3配合Cy3,
進(jìn)行熒光共振能量傳遞(Fluorescence Resonance Energy Transfer)之實(shí)驗(yàn),
以期透過化學(xué)觀點(diǎn),探討生物馬達(dá)的工作。

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