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本文標題："將玻片放到倒置式顯微鏡的載物臺上觀察昆蟲的結(jié)構(gòu)"
新聞來源：未知 發(fā)布時間：2013-8-19 23:50:32 本站主頁地址：http://www.y7853.cn
將玻片放到倒置式顯微鏡的載物臺上觀察昆蟲的結(jié)構(gòu)
顯微注射
1.取一完成的 microinjection pad，在上面呵氣，迅速滴上一滴Halocarbon oil 700。
2.重復(fù)三、（二）的 7.，利用挑蟲用針前端的睫毛輕輕滑過線蟲皮膚，
使其滾動到其腹部朝上，可以看到白色條狀物。
3.可重復(fù)數(shù)次，將數(shù)只蟲固定在 microinjection pad 上并調(diào)整好其位置以方便后續(xù)的注射。
4.將玻片放到倒立式顯微鏡的載物臺上，使用低倍率并調(diào)整線蟲的焦距，將要注射的蟲移到視野的中央
5.利用粗調(diào)節(jié)輪調(diào)整針的上下位置，使針頭下降到油中。
6. 為確保其針管流通，輕壓與握針器連接之針筒，觀察是否有液體流出。
7.轉(zhuǎn)成較高倍率，調(diào)整針使之與蟲位于
同一平面。可用針頭輕輕碰蟲觀察前端使否可碰觸到線蟲的最外層體壁。
8.將針輕壓滑過蟲的腹部，待針插入卵巢后微微抽出，緩慢地壓針筒，
使針里面的液體流入卵巢。等到蟲的卵巢有明顯脹大即停止壓針筒并
小心地抽出針。
9.將針微微上移，轉(zhuǎn)回低倍率的視野。
10. 調(diào)整線蟲的焦距，將其他要注射的蟲移到視野的中央。
11.重復(fù) 6.~8.將含有要放入的 DNA 液體注入要注射的蟲。
12.用粗調(diào)節(jié)輪將針往上移離玻片，將玻片移開倒立式顯微鏡。
13.取另一玻片在上面滴上一滴油，放
到倒立式顯微鏡的載物臺上，利用粗
調(diào)節(jié)輪小心地調(diào)整針的上下位置，使
針的前端微微下降到油滴中即可，避免碰到玻片的底部
11.在有注射完成的線蟲之玻片上滴上 PBS，
在顯微鏡下觀察線蟲是否有離開 microinjection pad 并游動。
12.將線蟲挑起放入 24 well 中的其中一個 well 并標示，待其產(chǎn)卵、孵化（約需 2~3 日），
并注意其復(fù)原狀況
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