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常見的細胞培養(yǎng)方法主要是細胞懸浮和單細胞培養(yǎng)
藥用植物細胞培養(yǎng)
1902年Haberlandt首次嘗試從開花植物的葉片中分離并培養(yǎng)單個細胞,
雖然他沒有使游離細胞進行細胞分裂,但他的研究工作激發(fā)了其他研究者
對這方面進行探索。到現(xiàn)在,這一領(lǐng)域的研究已經(jīng)取得了巨大進展,
不僅能夠培養(yǎng)游離的細胞,還能使培養(yǎng)在完全隔離的環(huán)境中的單細胞進行分裂,
并產(chǎn)生完整的植株。常見的細胞培養(yǎng)方法主要是細胞懸浮培養(yǎng)和單細胞培養(yǎng)。、
細胞懸浮培養(yǎng)
細胞懸浮培養(yǎng)一般是將未分化的易碎愈傷組織轉(zhuǎn)移到液體培養(yǎng)基中,
并使用適當(dāng)?shù)脑O(shè)備進行連續(xù)振蕩培養(yǎng)。在初始和系列繼代繁殖的植物
懸浮培養(yǎng)中被廣泛使用的是搖床。
把培養(yǎng)介質(zhì)放在搖床上振蕩主要有兩個目的:
一是振蕩能對細胞聚合體施加輕微的壓力,使其分散為較小的細胞團和
單個細胞;
其次,振蕩可以使介質(zhì)中的細胞和細胞團分布均勻。另外介質(zhì)的振蕩還
可以使培養(yǎng)介質(zhì)和空氣進行良好的氣體交換。
細胞懸浮培養(yǎng)一般分為3種類型:
1.分批培養(yǎng)
是指在固定體積的培養(yǎng)介質(zhì)中進行的細胞懸浮培養(yǎng),
當(dāng)培養(yǎng)環(huán)境中出現(xiàn)限制因子時,細胞停止生長,生物量不再增加。
2.連續(xù)培養(yǎng)
在懸浮培養(yǎng)中,以新鮮介質(zhì)流的形式連續(xù)向培養(yǎng)體系提供營養(yǎng),
而培養(yǎng)物的體積基本不變,連續(xù)加人的新鮮培養(yǎng)基僅與連續(xù)移出的
相等體積溢流之間保持平衡。
3.半連續(xù)培養(yǎng)
在半連續(xù)培養(yǎng)中采用的是“抽干與再裝滿”的方式,新鮮培養(yǎng)基
的加人是不連續(xù)的,而是被偶爾的“抽干與再裝滿”過程間隔開,
所以被移出的培養(yǎng)基中是被相應(yīng)體積的新鮮培養(yǎng)基所全部取代。
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