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熒光顯微鏡的光學(xué)設(shè)計中光源較普通光鏡有何不同
光源
由于光源發(fā)出的光譜能量中只有很少部分
能量可激發(fā)出熒光,故熒光
顯微鏡必須裝備強光源。
特點,熒光顯微術(shù)可用紫外光激發(fā)或紫藍(lán)光激發(fā)。
紫外光的優(yōu)點在于可觀察機體組織的自體熒光
(如核酸就需要用紫外光激發(fā))。
在組織學(xué)中便于區(qū)別背景熒光和染色目標(biāo)的熒光。
但紫外光的缺點較多,由于紫外光的光子能量大,
常常迅速引起標(biāo)本熒光的光致碎滅(quenching),標(biāo)本難于
重復(fù)觀察,使攝影發(fā)出困難。而且,對絕大多數(shù)熒光色素
來說,紫外區(qū)不是它最大的吸收區(qū),因而不能使熒光色素充分
激發(fā)。另外,對長期操作的人員來說,紫外光容易引起對眼
睛的傷害,而紫藍(lán)光則基本上沒有這些缺點。
紫藍(lán)光對熒光的碎滅作用比較微弱。同一標(biāo)本可以長期觀察,
易于攝影和記錄結(jié)果。并且處在大多數(shù)熒光色素的最大光譜吸收區(qū),
容易激發(fā)起較強的熒光。在一般應(yīng)用熒光色素的熒光顯微術(shù)工作
中,用紫藍(lán)光作激發(fā)光源比紫外光好。
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