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顯微熒光分光光度計(jì)的用途,有哪些優(yōu)點(diǎn)
顯微熒光分光光度計(jì)是一種在一定波長(zhǎng)范圍內(nèi)測(cè)定
熒光顯微物體所發(fā)射的熒光量的儀器,
實(shí)質(zhì)上它是分光光度計(jì)與
熒光顯微鏡的結(jié)合。它通過
測(cè)量某些生物學(xué)結(jié)構(gòu)(例如膠原纖維、葉綠體等)的自發(fā)熒光
或用熒光染料染色的某些生物學(xué)物質(zhì)的繼發(fā)熒光,
從而對(duì)生物學(xué)標(biāo)木進(jìn)行定量分析。顯微熒光分光光度計(jì)
與顯微分光光度計(jì)的差別僅僅是所使用的
顯微鏡不同而己,
同以光的吸收為基礎(chǔ)的顯微分光光度術(shù)相比較,顯微熒光
光度術(shù)具有一些明顯的優(yōu)點(diǎn)。
首先,當(dāng)背景足夠暗時(shí),這個(gè)方法對(duì)于非常少量的熒光物質(zhì)是高度靈敏的,
一般熒光法所用染料的最低濃度比其他吸收法低1萬倍。
第二,由于熒光物質(zhì)木身就是自發(fā)光物體,不管測(cè)闌內(nèi)物體的形狀是規(guī)則
的還是不規(guī)則的,不節(jié)物質(zhì)分布是均勻的還是不均勻的,
由物體所輻射的光量子將在光電倍增管上產(chǎn)生相同的效應(yīng)
因此對(duì)于顯微熒光光度術(shù)來說就避免了分布誤差。
第三,使用這種方法操作比較簡(jiǎn)便,測(cè)量迅速,特別適合于大量樣品的分析。
因此,顯微熒光分光光度計(jì)己經(jīng)應(yīng)用于蛋白質(zhì)、核酸等大分子物質(zhì)的細(xì)胞化學(xué)
和組織化學(xué)、熒光抗體技術(shù)和酶標(biāo)技術(shù)等廣泛的領(lǐng)域。同時(shí),掃描技術(shù)也已被
用于顯微熒光分光光度計(jì)中。
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