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本文標(biāo)題:"動物細胞標(biāo)本制備的步驟-光學(xué)分析常識"

新聞來源:未知 發(fā)布時間:2014-2-22 19:53:51 本站主頁地址:http://www.y7853.cn

動物細胞標(biāo)本制備的步驟-光學(xué)分析常識

原生動物的活體染色

    絕大多數(shù)的生物染料,對細胞都有較大的毒害作用,能用于活
體染色的僅有少數(shù)幾種。因而,生物活體染色的方法并不多。在原
生動物上應(yīng)用的活體染料,通常只有兩種,即中性紅和詹納斯綠。

    1.中性紅活體染色中性紅是一種專一的液泡系染色劑。而
且,中性紅的顯色反應(yīng)與PH值有密切關(guān)系,在酸性條件下顯紅
色,在堿性條件下則顯黃色。在原生動物上,用中性紅染色,可以活
體觀察其體內(nèi)食物泡的形成和消化的全過程。剛形成的食物泡,內(nèi)
含豐富的酸性水解酶,呈酸性,被中性紅染成粉紅色。當(dāng)食物泡逐
步被消化,由酸性向堿性轉(zhuǎn)化時,中性紅的顯色反應(yīng)便隨之由紅向
黃變化,接近消化完了的食物泡呈棕黃色。一般在原生動物上使用
的中性紅染料,其濃度為萬分之一。

    中性紅染液的配制方法有兩種。一種是用蒸餾水配成0.1緯
的母液,置暗處保存,使用時稀釋10倍。另一種是用無水酒精配成
0.1%的母液,置暗處保存,使用時稀釋10倍。
    在載玻片上滴上一滴濃集的原生動物,加上蓋玻片。在蓋玻片
的一側(cè)滴加一滴萬分之一的中性紅水溶液,然后在蓋玻片的相對
一側(cè)用吸水紙條吸水,使中性紅染液慢慢地滲入蓋玻片內(nèi)。立即置
載玻片于顯微鏡下觀察。另一種方法是,在載玻片上滴上一滴萬分
之一的中性紅酒精溶液,待其干燥后,滴上一滴濃集的原生動物,
加上蓋玻片,即可置顯微鏡下觀察。

    2.詹納斯綠活體染色詹納斯綠是一種染線粒體的特異染
料,可以用它活體顯示原生動物細胞內(nèi)的線粒體。一般使用詹納斯
綠配成萬分之一的使用染液。注意詹納斯綠對細胞仍有一點毒性,
濃度掌握很關(guān)鍵,不可過高。詹納斯綠的配制和使用方法同中性紅
完全一樣。但是詹納斯綠保存過久,將會降低或失去氧化能力,致
使染色效果下降或染色失敗。

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