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本文標題："熒光顯微鏡觀察較厚熒光標本圖像模糊的原因"
新聞來源：未知 發(fā)布時間：2014-2-28 23:36:49 本站主頁地址：http://www.y7853.cn
熒光顯微鏡觀察較厚熒光標本圖像模糊的原因
共聚焦顯微鏡可清晰地顯示相對較厚的（厚達幾百微米）標本內(nèi)
部結(jié)構(gòu)圖像，尤其適于檢測熒光標本。使用傳統(tǒng)的寬視場熒光顯微鏡
時，由于標本全層的熒光團都被光照到，而且它不僅收集焦平面上的
熒光信號，還收集焦平面上下方的熒光信號
所以用它來觀察較厚熒光標本時，圖像模糊且反差小。而共聚焦
顯微鏡則選擇性收集來自標本內(nèi)部相當于單一焦平面的光切面（約1
μm ）的光線。由于共聚焦顯微鏡基本沒有來自離焦區(qū)的光線，所以
它所觀察的焦平面內(nèi)結(jié)構(gòu)要比傳統(tǒng)顯微鏡清晰得多。一系列不同厚度
的光切面可使標本的三維圖像得以重建。
在檢測組織片或完整的小生物（如果蠅和斑馬魚的胚胎）中的熒
光染色細胞時，可選用共聚焦顯微鏡。共聚焦顯微鏡也可用來定位分
離細胞內(nèi)的熒光標記分子。由于其靈敏度較高，甚至可以用來監(jiān)控活
體標本內(nèi)的熒光，使得示蹤熒光探針如綠色熒光蛋白的利用成為可能。
此外，有些型號的共聚焦顯微鏡加以調(diào)整后，可用于光漂白實驗
及光敏化“籠鎖”分子（紫外光照射前為失活狀態(tài)）
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