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活細(xì)胞熒光成像實(shí)驗(yàn)用專業(yè)
顯微鏡-配備高清CCD相機(jī)
電荷藕合器(charged一coupled device, CCD)相機(jī)通常被應(yīng)用于獲取寬
視場(chǎng)熒光(Hiraoka et al. 1987; Taylor and Salmon )、轉(zhuǎn)盤式共聚
焦(Toornre and Pawley2006)和全內(nèi)反射熒光(TIRE) (Axelrod )顯微
鏡圖像。在活細(xì)胞熒光顯微實(shí)驗(yàn)中,收集數(shù)碼圖像就需要在獲取高質(zhì)量圖像
和減少樣品曝光以減少光毒性和光漂白之NI達(dá)到平衡。
一個(gè)熒光樣品數(shù)碼圖像質(zhì)量的好壞,CCD相機(jī)的選擇和相機(jī)的圖像收集設(shè)置
是主要的決定因素。它們是如何影響數(shù)碼圖像的質(zhì)量的,以及在活細(xì)胞熒光
成像實(shí)驗(yàn)中,該如何正確使用CCD相機(jī)。
最理想的情況是從CCD相機(jī)獲得的數(shù)碼圖像能精確地反映樣本在顯微鏡
下的光學(xué)影像。數(shù)碼圖像是由柵格化的像素構(gòu)成的,每一個(gè)像素都有指定的
灰度值,灰度值與樣品相對(duì)應(yīng)像素的區(qū)域所發(fā)出的光子數(shù)目有關(guān)(但并不相
等)
當(dāng)我們通過顯微鏡來獲取數(shù)碼圖像時(shí),我們就可以決定對(duì)應(yīng)圖像中每個(gè)像素
的樣品區(qū)域大小。
所以,一張數(shù)碼圖像就包含了樣品的兩類信息:強(qiáng)度和空間。一張數(shù)碼圖像
的特征包括信噪比(SNR)和分辨率,它們代表著數(shù)碼圖像是否很好地反映樣
品的情況。
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