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與光學(xué)顯微術(shù)相對照,前者是使用光學(xué)透鏡聚焦光束,在電
子顯微術(shù)中,使用的電磁透鏡(electromagnetic lenses)聚焦電
子束。由于電子可被空氣中的原子所吸收,所以標(biāo)本應(yīng)事先放置
在管中,進(jìn)行抽真空,即要求標(biāo)本置于真空(vacuum)中。電子顯
微鏡對生物物質(zhì)的分辨率可達(dá)到0 .10nm
透射電子顯微術(shù)是電子束直接穿透標(biāo)本,透射電子((transmitted
elec- trons)經(jīng)電磁透鏡聚焦成像,或照射到觀測屏幕上,或照
射到照相底片上。與標(biāo)準(zhǔn)的光學(xué)顯微術(shù)相同,觀察的是標(biāo)本的薄
切片。f 少寸于透射電子顯微術(shù),標(biāo)本的切片要求更薄( 厚度:50
一100nm)。由于電子均勻地穿透生物物質(zhì),使得未經(jīng)染色的標(biāo)本
映像不清,因此標(biāo)本應(yīng)進(jìn)行常規(guī)染色,這樣可以分散某些不被電
磁透鏡聚焦的入射電子,也就不會(huì)成像。
為此,常使用重金屬,例如金或餓,對生物物質(zhì)進(jìn)行染色。
特別是常用四氧化鋨(osmium tetroxide)對某些細(xì)胞成分,例如
膜. 進(jìn)行染色。得到黑色的映像。透射電子顯微鏡具有足夠的高
分辨率,可獲得純化的蛋白質(zhì),病毒及某些亞細(xì)胞器的形態(tài)信息。
抗體可用電子致密的金顆粒進(jìn)行標(biāo)記,猶如在免疫熒光顯微
術(shù)中用熒光化合物與樣品薄切片中的專一目的蛋白相結(jié)合。當(dāng)從
電子顯微鏡觀測時(shí),映像中抗體分子已與它的抗原相結(jié)合的部位
即可看到由于金顆粒顯示出的黑色斑點(diǎn),因此這一技術(shù)可用于確
定特殊抗原的位置。
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