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使用螺絲蓋狀細(xì)胞管保存細(xì)胞-細(xì)胞學(xué)
顯微鏡
細(xì)胞應(yīng)采用分步的方式達(dá)到臨界凍存點以使內(nèi)部冰晶不能形成和水外流受到抑制。
可購買程序化的細(xì)胞凍存器(Nunc ),來調(diào)節(jié)凍存細(xì)胞管的冷凍速率以達(dá)到最大限度地
保存細(xì)胞活力。一分鐘下降1℃為溫度降低的標(biāo)準(zhǔn)。較簡單的凍存裝置包括液氮罐頂蓋
上的隔溫支架,可使凍存管保持在氣相的上方。泡沫聚苯乙烯制作的隔溫支架能夠?qū)⒓?xì)
胞隔絕,凍存管下降至液氮罐的不同深度則能達(dá)到不同的冷凍速率。根據(jù)經(jīng)驗可判斷冷
凍管放置的深度。如果在液氮罐中無存放空間或已凍存細(xì)胞在貯存罐中的體積無法判斷
的情況下,可將細(xì)胞置一80℃存放數(shù)月。許多實驗室在將細(xì)胞放入液氮前先將細(xì)胞置
一80℃冰箱,放置一80℃的隔離程度憑經(jīng)驗而定。
細(xì)胞儲存在液氮罐氣相中的優(yōu)點是可使用螺絲蓋狀細(xì)胞管保存細(xì)胞,因為液氮不易
漏人管中。數(shù)家公司制造這種凍存管,可將該管淹沒于液氮中(如Union Carbide或MVE
Cyrogenics)。液氮漏人冷凍管中可導(dǎo)致細(xì)胞復(fù)蘇效率降低。
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