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常用的光學(xué)儀器-
熒光顯微鏡的結(jié)構(gòu)和應(yīng)用
由于沒有最優(yōu)化光學(xué)及有效的檢測器,傳統(tǒng)的熒光
顯微鏡是一個非常緊密的光路安
排((light budget)。為了使一部分光子到達眼睛或膠片,這些顯微鏡需要使盡可能多的光
子通過顯微鏡。由于只使用一種熒光染料,因此可以用一個短通激發(fā)光濾光器以使得所
有比某一靶波長短的波長的光都能通過。這一波長通常是最大激發(fā)光波長和最大發(fā)射光
波長的中間波長。將一個二色光束分裂器以45度角放置,以便將水銀弧燈的短波長光
反射至物鏡,物鏡再將光聚集到標本。發(fā)射出的熒光通過物鏡收集,由于是長波長的光
故能穿過光束分裂器,再通過一個長通發(fā)射光濾光器到達檢測器,常常是觀察者的眼
睛。二色光束分裂器原則上能單獨使用,然而實際上卻不行,因為從蓋玻片反射來的激
發(fā)光并不是完全由光束分裂器反射。激發(fā)和發(fā)射光濾光器可供多數(shù)波長選擇;光束分裂
器則將光反射至標本或透射到檢測器。多探針實驗時,需要用一個更狹
細的帶通濾光器代替短通激發(fā)濾光器;同時以帶通發(fā)射濾光器代替長通發(fā)射濾光器。
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