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玻璃化技術(shù)
將懸浮于液體薄膜中未染色的生物顆粒物質(zhì)玻璃化,輔以冰凍電子顯微鏡術(shù),是一種比
負(fù)染色更優(yōu)越的結(jié)構(gòu)分析方法.冰凍電子顯微術(shù)本身有一定的技術(shù)難度,
但近年來這些問題已經(jīng)在很大程度上被克服了。須知那些未染色的玻璃化或者冰凍含水
的標(biāo)本必須在嚴(yán)格的低沮、低電子劑量下研究,同時必須應(yīng)用數(shù)字圖像處理,
這樣才能將電
子顯微照片固有的對比度低的影像的結(jié)構(gòu)信息復(fù)原出來。吸附于炭或平展于孔洞中的風(fēng)干的
負(fù)染標(biāo)本,亦可以在葡萄糖或海藻糖溶液存在時.于低溫下進行研究。葡萄糖、海藻糖可以
為生物材料提供有效的保護,提高標(biāo)本移動度或降低被支持碳材料吸收,防止標(biāo)本扁平。這
種低沮負(fù)染色技術(shù)某種程度上比未染色標(biāo)本玻璃化操作簡便,可以得到約為1.5nm的分辨
率,但與近年來剛剛發(fā)展起來的結(jié)合了玻璃化技術(shù)以及負(fù)染色技術(shù)二者優(yōu)點的冰凍負(fù)染色技術(shù)
相比,還是遜色了一些。
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