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本文標(biāo)題:"自動(dòng)圖像顯微鏡測(cè)出細(xì)菌總數(shù)和平均面積含量數(shù)量"

新聞來(lái)源:未知 發(fā)布時(shí)間:2014-10-25 18:30:58 本站主頁(yè)地址:http://www.y7853.cn

自動(dòng)圖像顯微鏡測(cè)出細(xì)菌總數(shù)和平均面積含量數(shù)量

直接測(cè)量法

    與培養(yǎng)法不同,直接側(cè)定法在側(cè)試過(guò)程中不需要SRB生長(zhǎng),而是直接檢測(cè)SR B的存在
(包括SRB苗體的存在或SRB細(xì)胞所含化合物的存在)。

    ①顯微鏡直接計(jì)數(shù)法一般認(rèn)為顯微鏡只能測(cè)出系統(tǒng)細(xì)菌的總數(shù),不能檢出SRB的數(shù)
級(jí)。用異硫佩酸鹽熒光素(FITC)和間接熒光抗體
技術(shù)(IFA)可定承檢測(cè)細(xì)細(xì)菌總數(shù)和SRB含盆.它的原理是,F(xiàn)ITC染料可粘附到任何蛋白質(zhì)
上,微生物經(jīng)FITC處理后,在配有熒光的顯微鏡下,將染色細(xì)菌放大1 000或1 600倍就可觀
察,側(cè)得細(xì)菌總數(shù);而IFA間接熒光抗體只能在SRB上著色,在熒光顯微鏡上觀察可得到
SRB的數(shù)最.該方法的關(guān)鍵是染色劑的開(kāi)發(fā),它經(jīng)實(shí)驗(yàn)室制成后,可冷藏保存,使用多年。
    顯微鏡計(jì)數(shù)最大的特點(diǎn)是快速,但需特定的染料及受過(guò)培訓(xùn)的操作人員;由于該技術(shù)不
能分辨細(xì)菌的死活,一些死菌體也被計(jì)人,故顯微鏡計(jì)數(shù)往往偏高。

    ② ATP法三確酸腺昔(ATP)是所有活的生物細(xì)胞中都具有的一種化合物. ATP法通
過(guò)側(cè)定水樣中ATP的含盆來(lái)檢測(cè)水樣中的生物總數(shù)。由于在油田污水注水系統(tǒng)中ATP主要
來(lái)自于細(xì)苗(包括SRB),因此有人提出ATP法可用于油田污水注水水樣檢測(cè)包括SRB在內(nèi)
的細(xì)菌總數(shù)。

    ATP法的基木方法是,先過(guò)濾水樣去除其中的溶解性固體和鹽類(它們可能干擾洲定試
驗(yàn)),在過(guò)濾后的水樣中加人一種試劑(如三經(jīng)甲氨基甲烷)在一定條件下使細(xì)胞中的ATP釋
放出來(lái),再加人一種特殊醉(熒光素酶)。這種醉能與ATP作用引起光化學(xué)反應(yīng),該反應(yīng)所
產(chǎn)生的光強(qiáng)是定量的,即每個(gè)ATP產(chǎn)生1個(gè)光單位。通過(guò)光度計(jì)測(cè)定光強(qiáng),并查閱標(biāo)準(zhǔn)光強(qiáng)
—菌最關(guān)系曲線,則可得到水樣中的細(xì)苗總數(shù)。

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