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酵母菌細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)方法-懸滴觀察
顯微鏡
酵母營養(yǎng)細(xì)胞的增殖法
(一)引言酵母是一種生物,有增殖
的能力。增殖方法,多象植物發(fā)芽一樣,故稱芽殖,所以酵母的
別名,又叫芽殖菌。但有少數(shù)酵母分裂生殖,用懸滴培養(yǎng)法,可
于顯微鏡下,看見酵母的繁殖。
(二)材料1.于蔗糖豆芽汁培養(yǎng)24h 的釀酒酵母菌及裂殖酵
母菌(用時(shí)去上部液體)。2.凹載片及蓋片。3.表面玻璃1 片。
玻棒1 根。4.凡土林(已煮沸殺過菌)。5.蔗糖豆芽汁瓊脂1 管。
6.顯微鏡。7.酒精、酒精燈、接種針、接種環(huán)。8.無菌水,水浴。
(三)操作1.將瓊脂培養(yǎng)基放于水浴中煮化,并將管口殺菌。
2.凹載片、玻棒、表面玻璃均用酒精浸洗、燃燒,共3 次,
以殺菌,蓋片于火焰上烤燒殺菌,然后仰置,于凹載片之凹窩外
周,涂凡土林一圈,凹窩中央置無菌水少許,均須維持無菌狀態(tài)
。
3.傾已熔化的瓊脂1-2mL 于表面玻璃內(nèi),待冷至40℃左右
(表面底部觸手背不覺太熱)用接種環(huán)接取酵母少許,涂于表面
玻璃內(nèi)瓊脂邊沿,再用已殺菌的玻棒研磨涂酵母處,然后與全瓊
脂混合,置一滴瓊脂于蓋片中央,稍待凝固,倒蓋于凹載片上,
稍壓蓋片周邊,使凡土林貼牢,也可以接植酵母極少冷至45℃的
培養(yǎng)管內(nèi)的瓊脂培養(yǎng)基中,和勻,用無菌玻棒取出少許滴于蓋片
上,如前法,較為簡便。
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