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相差或DIC
顯微鏡經(jīng)常使樣品的對比度最大化提高分辨率
可存活微生物通常是借助濕法安裝(wet mount)來觀察。在這里,細(xì)胞懸
浮在水、鹽水或其他液體媒質(zhì)中,液體維持生存力并允許細(xì)胞移動。濕法安裝可
以在一個有蓋玻片的簡單載玻片或是有特殊構(gòu)造的載玻片上完成。例如,在后一
種情況中,含有樣品的液滴可以放置在玻璃蓋玻片上,然后將凹面朝下的載玻片
放在蓋玻片上。倒置蓋玻片和載玻片,液滴會懸掛在蓋玻片上。因為凹面朝下,
液滴不會受載玻片的影響,這樣會產(chǎn)生懸滴(hanging drop)。懸滴載玻片在監(jiān)測
細(xì)菌游動性方面很有用。相差或DIC顯微鏡經(jīng)常使用濕法安裝來使樣品的對比
度最大化。
盡管在濕法安裝中可以確定形態(tài),但這一般是比較困難的,這是因為缺少樣
品和周圍媒介之間的對比和細(xì)節(jié),同時也因為微生物是運動的。另外一種觀察形
態(tài)和其它內(nèi)部結(jié)構(gòu)的方法是在載玻片中將樣品固定、染色。這樣觀察到的僅是非
存活生物,這是因為固定和染色的過程會殺死生物。細(xì)胞的固定是在載玻片上將
細(xì)胞的液態(tài)懸浮物涂抹成薄膜,在空氣中晾干,制成涂片(smear)。然后將涂片
在火上輕微加熱幾秒鐘使其固定在載玻片上。用能看見細(xì)胞細(xì)節(jié)的染料將涂片染
色。有許多不同的染料供選擇,但通常將它們分為帶正電荷的堿性染料(basic
dye)和帶負(fù)電荷的酸性染料(acidic dye)。帶負(fù)電荷的細(xì)胞成分如核酸吸引堿性
染料,那些帶正電荷的如一些細(xì)胞膜成分,吸引酸性染料。
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