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熒光顯微鏡下檢測細(xì)胞內(nèi)的相應(yīng)夾層染色結(jié)構(gòu)
免疫熒光抗體技術(shù)的基本原理
抗體免疫球蛋白可以與熒光色素相結(jié)合,而不失其抗體的免
疫活性,稱為熒光抗體。免疫熒光技術(shù)即是用熒光抗體作為特異
性試劑,由以下幾種方法在熒光
顯微鏡下檢查組織細(xì)胞內(nèi)的相應(yīng)
抗原或抗體。
2.間接法熒光抗體間接染色法可以間接證明組織中的抗
原,又能顯示細(xì)胞內(nèi)或血清中韻未知抗體。
(1)抗原間接顯示法用間接法顯示抗原,須用兩種不同的
免疫血清,一種免疫血清(抗體I)不標(biāo)記,另一種免疫血清
(抗體Ⅱ)用熒光色素標(biāo)記。首先用未標(biāo)記的抗體與標(biāo)本內(nèi)相應(yīng)
的抗原作用,使成抗原抗體結(jié)合物。然后以標(biāo)記熒光色素的抗體
II(兔抗人或羊抗兔球蛋白熒光抗體)染色,即成為發(fā)熒光的抗
原一抗體一抗抗體結(jié)合物,以間接方法顯示標(biāo)本內(nèi)的抗原成分,這
種方法稱為雙層染色法。
國細(xì)胞內(nèi)抗體間接顯示法細(xì)胞內(nèi)抗體間接顯示法是用相
應(yīng)的特異性抗原處理標(biāo)本,使其與細(xì)胞內(nèi)的抗體結(jié)合。洗去多余
的抗原成分后再用熒光標(biāo)記的相應(yīng)抗體作用,熒光抗體與巴知細(xì)
胞內(nèi)抗體相結(jié)合的抗原結(jié)合。即中層的抗原一方面與標(biāo)本內(nèi)的抗
體結(jié)合,一方面與表層的熒光標(biāo)記抗體結(jié)合,這種染色法又稱夾
層染色法。
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