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本文標(biāo)題:"電融合技術(shù)的原理-細(xì)胞融合技術(shù)分析顯微鏡"

新聞來源:未知 發(fā)布時(shí)間:2016-7-31 3:09:21 本站主頁地址:http://www.y7853.cn

電融合技術(shù)的原理-細(xì)胞融合技術(shù)分析顯微鏡

    電融合技術(shù)的原理在于,懸于大小不同的兩平行電極間伊低導(dǎo)
電率溶液中的細(xì)胞,在1—100MHz和100—1000V/cm交流電場(chǎng)中,會(huì)
向小電極移動(dòng),并極化成偶極子,而沿電場(chǎng)力向排列成串,此時(shí)再
加上適當(dāng)強(qiáng)度和持續(xù)時(shí)間的高壓電脈沖,即可使相鄰細(xì)胞膜的接觸
區(qū)產(chǎn)生可逆電擊穿,從而觸發(fā)細(xì)艙融合。
    由了電融合技術(shù)具有融合率甚高,可達(dá)50—80%,以及可在顯
微鏡下定向誘導(dǎo)細(xì)胞融合和可直接挑選雜種細(xì)胞等優(yōu)點(diǎn),因而正日
益引起人們的重視。目前已有商品電融合器出售。為能在某些環(huán)節(jié)
上進(jìn)一步加以改進(jìn)和發(fā)展,則可望具有十分誘人的應(yīng)用前景。
   雜種細(xì)胞的篩選:在上述融合條件下,并非所有的細(xì)胞都能融
合。例如在以PEG作為融合劑時(shí),大約只有十萬分之一的細(xì)胞最終
能夠形成會(huì)增殖的雜種細(xì)胞。再加,細(xì)胞融合本身又帶有一定的隨
機(jī)性,除不同親本細(xì)胞間的融合外,還伴有各親本細(xì)胞的自身融合
。因此,在緊隨細(xì)胞融合之后,即須設(shè)法把含有兩親本細(xì)胞染色體
的雜種細(xì)胞分離或篩選出來。
   通常面臨的問題,則是須從大量快速增殖的親本細(xì)胞中分離出
少量生長緩慢的雜種細(xì)胞。最簡便的辦法無疑是應(yīng)用選擇培養(yǎng)基,
使親本細(xì)胞死亡,而僅讓雜種細(xì)胞存活下來。為此,已先后利用親
本細(xì)胞的藥物抗性、營養(yǎng)缺陷型和溫度敏感性等遺傳標(biāo)記,建立了
多種選擇系統(tǒng),并已成功地用于雜種細(xì)胞的篩選。此外,在融合前
用人工標(biāo)記親本細(xì)胞,或以致死劑量的生化阻抑劑來處理親本細(xì)胞
,也是一種較為有效的篩選辦法。、

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