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液相層析-利用酶溶解度的不同來分離酶
在液相層析中,靜相也是液體,是某種液體固定在多孔的凝膠
顆粒上。當(dāng)酶溶液裝進(jìn)層析柱之后,動相的緩沖液開始洗脫,酶分
子就以分配法則交流在兩種液體之間,逐漸得以分離。一般靜相用
的是極性液體,動相用的是非極性液體,兩者不得混溶。但也有靜
相用非極性液體,動相用極性液體的。由于表面張力的緣故,兩者
不會混溶在一起。
液相層析在本質(zhì)上仍屬于離子交換、親和與吸附各種層析,只
是靜相改由液體擔(dān)任,對于性質(zhì)不穩(wěn)定的蛋白質(zhì)來說,液相層析更
易于操作,利于分離。
一般說來,利用酶溶解度的不同來分離酶多用在提純過程的最
初階段,柱層析或電泳多用在最后階段。在最初階段,雜七雜八的
物質(zhì)極多,量又大。到了最后階段,酶已經(jīng)快被提純,量即變成很
。
在提純過程中,酶如果很快會分解,就必須設(shè)法趕快把酶提純
,這時(shí)快速的提純法,如硫酸銨沉淀法就值得考慮。酶原料來源
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