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本文標(biāo)題："酶即不易失活,磷酸鹽緩沖液最接近于生理液體"
新聞來源：未知 發(fā)布時(shí)間：2016-8-30 20:58:48 本站主頁地址：http://www.y7853.cn
酶即不易失活,磷酸鹽緩沖液最接近于生理液體
當(dāng)細(xì)胞破裂，將酶從其中分離出來以后，這些條件都不存在了，于
是在人造的緩沖液中，就面臨氧化、變性、以及活性部位遭受外界
因子的破壞。此外，酶也很容易為失去控制的蛋白酶所分解。為了
保持酶的活性，舉凡緩沖液的濃度、pH、溫度、輔因子、活性穩(wěn)定
劑等種種因素都需加以考慮，但原則上以盡量能恢復(fù)到細(xì)胞中原來
的天然環(huán)境為準(zhǔn)則。
緩沖液和pH的控制 以適當(dāng)?shù)木彌_液來控制pH是保持酶活性的
最基本條件。細(xì)胞里的pH一般都在6—8之間，所以如能把pH維持在
這個(gè)范圍之內(nèi)，酶即不易失活。磷酸鹽緩沖液最接近于體內(nèi)的生理
液體狀態(tài)，所以最為常用。但是帶有多個(gè)負(fù)電荷的磷酸根在濃度過
高時(shí)，有時(shí)對(duì)酶會(huì)發(fā)生抑制作用，這點(diǎn)要加以考慮。
酶活性的測(cè)定與保持
無論在分離酶的過程或酶被提純以后，都要隨時(shí)測(cè)定酶活性，
算出酶的比活性，用以觀察分離過程中各步細(xì)節(jié)的效能，粗酶的取
舍，及貯存期酶質(zhì)量的變化。酶活性的測(cè)定乃酶動(dòng)力學(xué)在實(shí)際方面
的應(yīng)用。酶在不適當(dāng)?shù)沫h(huán)境下極易失活，所以如何才能保持酶的活
性長期不變，或緩慢地失活，是在分離酶時(shí)所必須解決的問題。
影響酶活性測(cè)定的因素
由酶的動(dòng)力學(xué)研究。知道酶活性和底物、激活劑與抑制劑的濃
度、緩沖液的種類和濃度、pH、溫度、以及酶本身的濃度都有關(guān)系
。通常都盡量在最適當(dāng)?shù)臈l件下測(cè)量酶的活性，以求達(dá)到最大的酶
反應(yīng)速度
不過限于種種原因，如底物的溶解度太低，或售價(jià)太高，或
有時(shí)尚需要其他連鎖的酶反應(yīng)來輔助酶活性的測(cè)定，則這時(shí)必須對(duì)
酶活性測(cè)定的條件作適當(dāng)?shù)男拚�，方符合�?shí)際的需要。
底物濃度、激活劑及抑制劑 酶反應(yīng)在底物的濃度達(dá)到最高的
合理濃度時(shí)會(huì)得到它最大的活性。
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