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分光光譜儀或螢光光譜儀測出化合物
恒溫反應(yīng) 恒溫反應(yīng)要在固定溫度下進行,反應(yīng)溶液體積要盡
量的小,有時甚至50—100p1即足夠用,以節(jié)省價值昂貴的試劑。
在反應(yīng)緩沖液中首先加入底物,由零時開始,將一定體積的酶溶液
加入反應(yīng),迅速攪拌,待反應(yīng)進行至一定時間,即將反應(yīng)中止,再
去測量產(chǎn)物生成的量。
產(chǎn)物的測量 酶反應(yīng)的產(chǎn)物可用酶法,化學(xué)法或放射化學(xué)法測
出。
酶法是使用其他純酶將產(chǎn)物直接或間接轉(zhuǎn)變成為一個可用分光
光譜儀或螢光光譜儀測出的化合物。通常如以酶法測出產(chǎn)物的量,
多用連續(xù)測酶法,將待測活性的酶和指示酶連鎖到一起。待酶反應(yīng)
開始后,產(chǎn)物的量即可經(jīng)由指示酶的反應(yīng)測出這樣的方法雖然簡便
,但如能將反應(yīng)劃分成兩個階段,不但準確性高,且用酶量低,可
以省去了不少花費。
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