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本文標(biāo)題："氨基酸的混合物測(cè)量記錄精密的儀器實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)"
新聞來(lái)源：未知 發(fā)布時(shí)間：2016-9-26 13:37:13 本站主頁(yè)地址：http://www.y7853.cn
氨基酸的混合物測(cè)量記錄精密的儀器實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
當(dāng)洗脫緩沖液的pH增大時(shí)，氨基酸上面的正電荷減少，直到氨基與
樹脂的結(jié)合減弱到可以被洗下時(shí)為止。每種氨基酸達(dá)到這一點(diǎn)的條件是
不同的，這取決于分子上其他可電離基團(tuán)的性質(zhì)，在非極性氨基酸的情
況下，甚至還取決于側(cè)鏈的性質(zhì)。因此利用在低pH時(shí)吸附氨基酸，然后
再慢慢提高洗脫劑的pH和離子強(qiáng)度，就能成功地做到重復(fù)性好而又輪廓
清楚地把所有氨基酸分開。在現(xiàn)代實(shí)際中，這種過(guò)程已全部自動(dòng)化了。
為了容易分開，氨基酸的混合物被自動(dòng)地放到一根至少含有二種類型樹
脂的柱上去。在洗脫緩沖液中，產(chǎn)生一種pH和離子強(qiáng)度的梯度，然后把
從柱底流出的氨基酸用比色測(cè)定法監(jiān)控，測(cè)得的結(jié)果接著就被記錄于記
錄紙上。在最精密的儀器中，比色數(shù)據(jù)可輸入到臺(tái)式計(jì)算機(jī)，計(jì)算機(jī)自
動(dòng)計(jì)算各種氨基酸的量，以及該氨基酸在原來(lái)蛋白質(zhì)中的百分率，或更
通常是計(jì)算殘基數(shù)／1000殘基。
要測(cè)定一個(gè)蛋白質(zhì)的氨基酸順序，必須把蛋白質(zhì)斷成有限數(shù)量的較
小的肽單位。為了形成合理數(shù)量的肽以進(jìn)行以后的分析，斷裂必須是專
一的和重復(fù)性好的。芳此常利用純化的蛋白酶，多半是胰蛋白酶、胰凝
乳蛋白酶和胃蛋白酶來(lái)裂解蛋白質(zhì)。用這些酶去水解蛋白質(zhì)只需極少量
就夠了，而且近年來(lái)已制成能把這些酶結(jié)合到不溶性的、不活潑的聚合
支持物上去的活性衍生物。使用這些不溶性的衍生物，酶就能用離心法
從水解溶液中回收并再次利用。
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