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握雙向瓊脂擴(kuò)散實(shí)驗(yàn)的基本原理-
生物顯微鏡
可溶性抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合,在有適量電解質(zhì)存在的條件下,形成
肉眼可見(jiàn)的沉淀物,稱為沉淀反應(yīng)。根據(jù)抗原與抗體反應(yīng)的環(huán)境條件及
附加因素,沉淀反應(yīng)可以分為環(huán)狀沉淀、絮狀沉淀和凝膠中的沉淀反應(yīng)
三種基本類型。
在凝膠中的沉淀反應(yīng),可根據(jù)抗原與抗體反應(yīng)的方式和特性分為瓊
脂擴(kuò)散、免疫電泳、對(duì)流免疫電泳(亦稱反向免疫電泳或免疫電滲電泳)
和火箭免疫電泳等�,F(xiàn)介紹雙向瓊脂擴(kuò)散實(shí)驗(yàn)。
[目的]初步掌握雙向瓊脂擴(kuò)散實(shí)驗(yàn)的基本原理、方法、結(jié)果、分析
及臨床用途。
[材料]甲胎蛋白陽(yáng)性血清(或臍帶血),甲胎蛋白免疫血清,優(yōu)質(zhì)瓊
脂粉,1%疊氮鈉,吸管,載玻片,金屬打孔器(外徑3mm),微量滴管。
[方法]
1。用生理鹽水,制成2%瓊脂凝膠(加疊氮鈉至最后濃度為0.1%
,防腐)。 .
2.制備瓊脂板取潔凈載玻片置平臺(tái)上,用吸管緩慢加溶化冷卻至5
0~60℃瓊脂于玻片上,每片約3.5ml,滴加時(shí)勿溢出玻片邊緣,并避
免產(chǎn)生氣泡,冷卻即成。
3.打孔用打孔器打呈三角形排列的三個(gè)孔,孔間距離為3ram�?�
底補(bǔ)以少量瓊脂。
4.加樣在其中一孔滴加甲胎蛋白免疫血清,另二孔分別滴加不稀
釋及1:2稀釋之甲胎蛋白。
5.溫育加好樣品的瓊脂板置濕盒內(nèi),于37%溫箱中靜置24小時(shí),
觀察抗原抗體產(chǎn)生的白色沉淀線。
[結(jié)果]如與待檢標(biāo)本產(chǎn)生沉淀線,該線與陽(yáng)性對(duì)照所產(chǎn)生的沉淀線
吻接成一線則表示陽(yáng)性。如無(wú)沉淀線,或與陽(yáng)性對(duì)照沉淀交叉,則表示
陰性。
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