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稀釋過程中會遇到潛在的細(xì)胞結(jié)塊現(xiàn)象
在準(zhǔn)備稀釋梯度時,保持無菌狀態(tài)非常重要。例如,轉(zhuǎn)移樣品
時,裝有稀釋空白液的試管口必須經(jīng)過灼燒滅菌。必須使用滅菌的
1.0mL移液管(0.1mL刻度)或者可變體積的、配有滅菌塑料槍頭的
移液槍在各個梯度之間轉(zhuǎn)移液體。滅菌的移液管或移液槍槍頭只可
以用1次,以后的操作都要換新的無菌移液管或移液槍槍頭。移液
槍要用70%(體積分?jǐn)?shù))酒精進(jìn)行表面擦拭消毒,并且每年要進(jìn)行精
度校準(zhǔn)。
稀釋過程中會遇到一個問題:存在潛在的細(xì)胞結(jié)塊現(xiàn)象。例如
,片球菌中某些酵母會分泌一種黏液使細(xì)胞結(jié)塊,導(dǎo)致幾個至20個
或以上的細(xì)胞聚集在一起。除非使用物理方法進(jìn)行分散,否則這些
細(xì)胞結(jié)塊就會給固體平板計數(shù)和數(shù)據(jù)的統(tǒng)計描述帶來困難。為了將
細(xì)胞結(jié)塊帶來的誤差降到最小,在梯度稀釋過程中;每次轉(zhuǎn)移液體
之前必須充分混勻后才能進(jìn)行下一步稀釋
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