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本文標(biāo)題："掃描電子顯微鏡能觀察細(xì)胞的三維空間結(jié)構(gòu)"
新聞來(lái)源：未知 發(fā)布時(shí)間：2016-11-15 11:43:38 本站主頁(yè)地址：http://www.y7853.cn
掃描電子顯微鏡能觀察細(xì)胞的三維空間結(jié)構(gòu)
掃描電鏡觀察
透射電鏡僅能研究細(xì)胞的一個(gè)薄切面，掃描電鏡則能觀察細(xì)胞的三
維空間結(jié)構(gòu)，對(duì)研究細(xì)胞表面結(jié)構(gòu)及染色體亞微結(jié)構(gòu)都有用。
1．培養(yǎng)細(xì)胞的樣品處理：生長(zhǎng)于蓋玻片上的細(xì)胞用Palade緩沖液
或其它平衡鹽清洗2～3次。培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞用橡皮刮刮下，或單純滴管
吹打，也可用胰酶消化。但胰酶消化后，細(xì)胞表面結(jié)構(gòu)有改變。收集細(xì)
胞后用平衡鹽洗滌。
2，沿管壁徐徐加入0，5嚦戊二醛，約2～4m1，邊加邊搖，以防止
細(xì)胞聚集成團(tuán)，并置4℃固定半小時(shí)。
3．加箏滲磷酸鹽緩沖液約10～15m1，洗滌，低速離心后棄去上清
液。余下適量的細(xì)胞懸液。備用。
4．用等滲磷酸緩沖液配制的o．1g6多聚賴氨酸(分子量60，000～1
00，000)溶液滴在4mmX6mm大小洗凈烘干的蓋玻片上，室溫下靜置5～lo
min，用濾紙從邊緣吸去多余的液體。 ，
5．當(dāng)蓋玻片尚未完全千時(shí)，將上述備用的細(xì)胞懸液滴在涂有多聚
賴氨酸陽(yáng)離子膜的玻片上，靜置5—30mia，用濾紙吸去多余的液體。
6，將附有細(xì)胞的玻片放入1嚦戊二醛4℃固定山．
7，磷酸緩沖液從玻片邊緣滴加，洗滌數(shù)次后，固定1h(4~C)。
8．磷酸緩沖液洗滌，梯度丙酮脫水，入醋酸異戊酌。待干燥處理
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