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本文標(biāo)題："細(xì)胞小培養(yǎng)皿直接置于體視顯微鏡下觀察"
新聞來(lái)源：未知 發(fā)布時(shí)間：2016-12-15 23:41:29 本站主頁(yè)地址：http://www.y7853.cn
細(xì)胞小培養(yǎng)皿直接置于體視顯微鏡下觀察
一旦種植了原代細(xì)胞，細(xì)胞會(huì)處于一個(gè)高度營(yíng)養(yǎng)的條件下，
貼附到底物上，但是，絕大多數(shù)細(xì)胞會(huì)死亡或發(fā)生分化。培養(yǎng)2～3
d后，增殖性細(xì)胞會(huì)離開(kāi)組織培養(yǎng)皿底部，聚集成神經(jīng)球樣的細(xì)胞
團(tuán)，通常培養(yǎng)48h可以觀察到。這些聚集的細(xì)胞團(tuán)不應(yīng)被誤認(rèn)為原
代神經(jīng)球。聚集細(xì)胞團(tuán)塊的數(shù)量直接與培養(yǎng)基中細(xì)胞碎片和死細(xì)胞
數(shù)量有關(guān)。通常情況下，這些假神經(jīng)球是很大的，但是它們是由小
的、變黑的、形狀不規(guī)則的細(xì)胞組成的。
pH誘導(dǎo)法
將相對(duì)接合型的兩種純系培養(yǎng)液各1 mL混合于小培養(yǎng)皿中，然
后分別向混合培養(yǎng)液中加入新鮮配制的一定pH梯度的培養(yǎng)液2 mL。
在20～25℃下培養(yǎng)。將小培養(yǎng)皿直接置于體視顯微鏡下觀察。
測(cè)定培養(yǎng)溫度，準(zhǔn)確記錄出現(xiàn)接合生殖相的pH值、接合生殖率
最高時(shí)的pH值、接合生殖相不再出現(xiàn)時(shí)的pH值，尋找不同pH值下接
合生殖率的變化規(guī)律，分析變化原因。通過(guò)計(jì)算接合生殖率找出誘
導(dǎo)接合生殖的最適pH值。
每個(gè)組合設(shè)3個(gè)重復(fù)，需同學(xué)們協(xié)作完成。
溫度誘導(dǎo)法
先通過(guò)智能恒溫培養(yǎng)箱找出致死大草履蟲(chóng)的最高溫度、最低溫
度，以確定大草履蟲(chóng)存活的溫度范圍。
將相對(duì)接合型的兩種純系培養(yǎng)液和新鮮培養(yǎng)液各l mL混合于小
培養(yǎng)皿中，然后分別放入恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，在大草履蟲(chóng)存活的溫
度范圍內(nèi)，以1℃為梯度改變培養(yǎng)溫度。2 h后，每隔10 min將小培
養(yǎng)皿直接置于體視顯微鏡下觀察，以判斷是否出現(xiàn)接合生殖相。每
個(gè)組合設(shè)3個(gè)重復(fù)。
測(cè)定培養(yǎng)液的pH值，準(zhǔn)確記錄開(kāi)始出現(xiàn)接合生殖相的溫度、接
合生殖率最高時(shí)的溫度、接合生殖相不再出現(xiàn)時(shí)的溫度，尋找不同
溫度下接合生殖率的變化規(guī)律，分析變化原因。依據(jù)接合生殖率找
出誘導(dǎo)接合生殖的最適溫度。
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